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目的 建立造血干细胞(HSCs)体外衰老模型,探讨其衰老的相关生物学调控机制,为寻找延缓HSC衰老方法奠定基础. 方法 用免疫磁性分选法分离、纯化小鼠Sca-1+ HSCs,用流式细胞术鉴定分选细胞纯度,免疫荧光检测分选细胞Sca-1+ 表达.用三丁基过氧化氢(t-BHP)100μmol/L诱导Sca-1+ HSCs 6h,建立HSCs衰老体外模型.采用造血祖细胞集落培养,细胞周期分析和衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色观察衰老HSCs的生物学特点.DNA印迹法(Southern blotting)与TRAP-PCR SYBR Green染色法检测HSCs端粒长度和端粒酶活性.RT-PCR法检测衰老相关基因p16Ink4a、p19Arf、p53、p21Cip1/Waf1mRNA的表达水平. 结果 免疫磁性分选法分离、纯化的Sca-1+ HSCs纯度可达(87.33±1.25)
作者：周玥；杨斌；姚欣；王亚平
来源：解剖学报 2010 年 41卷 5期
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