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目的 探讨编码小鼠精子赤道段蛋白(mESP)的DNA疫苗免疫避孕功能.方法 构建PcDNA3.1/mESP真核表达质粒,表达mESP蛋白N-端片段.将纯化后的质粒直接肌肉注射免疫8只BALB/c雌性小鼠,以空载质粒pcDNA3.1免疫作为对照组.通过RT-PCR检测重组质粒在小鼠体内的表达情况.通过ELISA和双重免疫荧光技术,检测免疫后小鼠体内mESP抗体反应.通过交配实验研究DNA免疫对小鼠生育功能的影响.结果 接种重组质粒小鼠的肌肉呈现mESP cDNA条带阳性,说明重组质粒在体内表达.DNA免疫小鼠体内产生了特异性的mESP抗体.DNA免疫小鼠产仔率无改变,平均产仔数低于对照组(P<0.05).结论 DNA疫苗用于免疫避孕需进一步提高免疫效果.

作者:吕正梅;王旻;徐晨

来源:解剖学报 2011 年 42卷 1期

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作者:
吕正梅;王旻;徐晨
来源:
解剖学报 2011 年 42卷 1期
标签:
精子赤道段蛋白 DNA疫苗 免疫避孕 双重免疫荧光技术 反转录-聚合酶链式反应 小鼠
目的 探讨编码小鼠精子赤道段蛋白(mESP)的DNA疫苗免疫避孕功能.方法 构建PcDNA3.1/mESP真核表达质粒,表达mESP蛋白N-端片段.将纯化后的质粒直接肌肉注射免疫8只BALB/c雌性小鼠,以空载质粒pcDNA3.1免疫作为对照组.通过RT-PCR检测重组质粒在小鼠体内的表达情况.通过ELISA和双重免疫荧光技术,检测免疫后小鼠体内mESP抗体反应.通过交配实验研究DNA免疫对小鼠生育功能的影响.结果 接种重组质粒小鼠的肌肉呈现mESP cDNA条带阳性,说明重组质粒在体内表达.DNA免疫小鼠体内产生了特异性的mESP抗体.DNA免疫小鼠产仔率无改变,平均产仔数低于对照组(P<0.05).结论 DNA疫苗用于免疫避孕需进一步提高免疫效果.