目的 采用激光扫描共焦显微镜观察体外培养胎鼠海马神经干细胞(NSCs)增殖、凋亡及其分化情况.方法 体外分离培养胚胎大鼠海马NSCs,把神经干细胞球培养在共焦显微镜专用培养皿中.用Hoechst 33258染细胞核,免疫荧光细胞化学技术检测巢蛋白(Nestin)的表达以鉴定NSCs,检测神经元、星形胶质细胞的特异性标记物β-Ⅲ型微管蛋白(β-Ⅲtubulin)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达以测定NSCs的分化能力.通过激光扫描共焦显微镜对神经干细胞球进行光学连续断层扫描,然后用软件进行三维重建,立体动态观察神经球.结果 通过激光扫描共焦显微镜观察到神经球Nestin阳性表达,NSCs的突起随着发育逐渐增长,并相互缠绕,经2次传代后培养7d的NSCs凋亡率为(8.60±2.20)％.在血清诱导下分化后的细胞突起从细胞球向四周呈放射状迁移,且突起相互交错成网状.经2次传代后诱导分化7d的NSCs分化为星形胶质细胞和神经元的比例分别为(68.60±7.64)％和(29.90±8.22)％ (P ＜0.01).结论 对大鼠神经干细胞球的增殖、凋亡及分化的观察激光扫描共焦显微镜发挥了独特的优势.
作者：欧阳长杰；段线花；王德广；曲德伟
来源：解剖学报 2012 年 43卷 6期
