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目的:探讨基质细胞衍生因子-1α( SDF-1α)受体CXCR4、CXCR7在骨髓间充质干细胞( BMSCs )中蛋白和 mRNA 的表达;及 SDF-1α/CXCR4/CXCR7轴对 BMSCs 迁移作用的可能机制。方法体外培养大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定细胞表面抗原CD29、CD44和CD34。应用CXCR4特异性拮抗剂AMD3100及CXCR7中和抗体分别阻断CXCR4及CXCR7,通过 Western blotting 和RT-PCR分别检测BMSCs 蛋白和mRNA的表达变化;Transwell法检测细胞迁移能力。本次实验分为单纯BMSCs组( A)、AMD3100预处理BMSCs组( B)、CXCR7中和抗体预处理BMSCs组( C)及AMD3100+CXCR7中和抗体预处理BMSCs组( D)。结果经鉴定第3代大鼠BMSCs中CD29和CD44均呈阳性表达,而CD34表达阴性。 BMSCs中CXCR4、CXCR7蛋白和mRNA均有表达。与A组相比,B组及D组CXCR4及CXCR7蛋白表达明显受到抑制(P<0.05),C组只有CXCR7蛋白表达降低(P<0.05);各组CXCR4 mRNA和CXCR7 mRNA的表达差异均无显著性。 SDF-1α可以诱导BMSCs迁移,与0μg/L组相比,10μg/L组和100μg/L组穿膜细胞数均显著增多(P<0.01),与10μg/L组相比,100μg/L组穿膜细胞数亦明显增多(P<0.01);AMD3100和CXCR7中和抗体均能抑制BMSCs的迁移作用(P<0.05),当两者同时作用时

作者:王玉兰;何晓梅;唐薇;顾怡萍;张世春;汤曼;徐铁军;高殿帅

来源:解剖学报 2014 年 5期

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王玉兰;何晓梅;唐薇;顾怡萍;张世春;汤曼;徐铁军;高殿帅
来源:
解剖学报 2014 年 5期
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基质细胞衍生因子-1α CXCR4 CXCR7 骨髓间充质干细胞 免疫印迹法 大鼠 Stromal cell derived factor-1α CXCR4 CXCR7 Bone marrow mesenchymal stem cell Western blotting Rat
目的:探讨基质细胞衍生因子-1α( SDF-1α)受体CXCR4、CXCR7在骨髓间充质干细胞( BMSCs )中蛋白和 mRNA 的表达;及 SDF-1α/CXCR4/CXCR7轴对 BMSCs 迁移作用的可能机制。方法体外培养大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定细胞表面抗原CD29、CD44和CD34。应用CXCR4特异性拮抗剂AMD3100及CXCR7中和抗体分别阻断CXCR4及CXCR7,通过 Western blotting 和RT-PCR分别检测BMSCs 蛋白和mRNA的表达变化;Transwell法检测细胞迁移能力。本次实验分为单纯BMSCs组( A)、AMD3100预处理BMSCs组( B)、CXCR7中和抗体预处理BMSCs组( C)及AMD3100+CXCR7中和抗体预处理BMSCs组( D)。结果经鉴定第3代大鼠BMSCs中CD29和CD44均呈阳性表达,而CD34表达阴性。 BMSCs中CXCR4、CXCR7蛋白和mRNA均有表达。与A组相比,B组及D组CXCR4及CXCR7蛋白表达明显受到抑制(P<0.05),C组只有CXCR7蛋白表达降低(P<0.05);各组CXCR4 mRNA和CXCR7 mRNA的表达差异均无显著性。 SDF-1α可以诱导BMSCs迁移,与0μg/L组相比,10μg/L组和100μg/L组穿膜细胞数均显著增多(P<0.01),与10μg/L组相比,100μg/L组穿膜细胞数亦明显增多(P<0.01);AMD3100和CXCR7中和抗体均能抑制BMSCs的迁移作用(P<0.05),当两者同时作用时