目的 探讨紫杉醇诱导肝癌HepG2细胞凋亡时miRNA对基因的沉默的作用.方法 用不同浓度紫杉醇处理肝癌HepG2细胞后,流式细胞术检测其细胞凋亡;通过实时定量PCR(Real-time PCR)测定miR-224和凋亡抑制因子5(api-5)mRNA的表达;用免疫组织化学二步法和免疫印迹法(Western blotting)检测API-5蛋白的表达.结果 紫杉醇诱导HepG2细胞凋亡时,通过2-△△CT法分析发现,除了0.5mg/L、1 mg/L紫杉醇培养HepG2肝癌细胞24h miR-224不升反降外,其他浓度和处理时间miR-224表达均显示上调;0.5mg/L、1 mg/L紫杉醇培养HepG2肝癌细胞24h api-5 mRNA表达稍微降低,0.5mg/L紫杉醇处理48h无增长,其他浓度和处理时间api-5 mRNA表达均上调;应用IPP v 5.1图像分析软件处理,经t检验分析发现,紫杉醇处理后API-5蛋白表达均下调(P＜0.05).结论 上调的miR-224可能作用其靶基因api-5的表达,通过与api-5 mRNA的3'UTR结合阻止翻译的完成,从而对肝癌细胞的凋亡途径产生影响.
作者：单长民；孙业盈；李娟；王东；姚庆收；谭秀华；刘向勇
来源：解剖学报 2015 年 46卷 4期
