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目的 探讨胡桃醌对宫颈癌HeLa细胞促凋亡作用的机制,及其相关的信号转导通路.方法 选取处于对数生长期的HeLa细胞将其分为空白对照组和30μmol/L胡桃醌组.采用MTT法观察胡桃醌对不同时间点HeLa细胞的抑制作用;Hoechst 33258试剂盒,流式细胞仪测定胡桃醌对不同时间点HeLa细胞凋亡的影响;Westernblotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt通路中AKt及pAkt的表达.结果 MTT实验显示,与对照组比较,各时间点HeLa细胞具有抑制作用,且差异显著均有统计学意义(P <0.05,P<0.01);Hoechst 33258检测表明,30μmol/L胡桃醌处理细胞4,8,12h后可出现明显的细胞核典型凋亡细胞形态;细胞凋亡检测表明,30mol/L胡桃醌培养不同时间后,与对照组相比早期凋亡率明显增高;Western blotting检测显示,与正常对照组相比,30μmol/L胡桃醌处理细胞12h后,HeLa细胞Bcl-2,pAkt蛋白的表达明显降低,而Bax、Cleave-Caspase-3,Akt蛋白表达明显升高.结论 胡桃醌通过抑制PI3K/Akt通路,进而促进HeLa细胞凋亡.

作者:张巍;张若文;朱文赫;李妍;罗军;赵行宇;徐俊杰;姜艳霞;吕士杰

来源:解剖学报 2015 年 46卷 5期

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作者:
张巍;张若文;朱文赫;李妍;罗军;赵行宇;徐俊杰;姜艳霞;吕士杰
来源:
解剖学报 2015 年 46卷 5期
标签:
胡桃醌 磷脂酰肌醇3-激酶/Akt HeLa细胞 四甲基偶氮唑盐 Hoechst 33258染色 免疫印迹法 Juglone PI3K/Akt HeLa cell MTT Hoechst 33258 staining Western blotting
目的 探讨胡桃醌对宫颈癌HeLa细胞促凋亡作用的机制,及其相关的信号转导通路.方法 选取处于对数生长期的HeLa细胞将其分为空白对照组和30μmol/L胡桃醌组.采用MTT法观察胡桃醌对不同时间点HeLa细胞的抑制作用;Hoechst 33258试剂盒,流式细胞仪测定胡桃醌对不同时间点HeLa细胞凋亡的影响;Westernblotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt通路中AKt及pAkt的表达.结果 MTT实验显示,与对照组比较,各时间点HeLa细胞具有抑制作用,且差异显著均有统计学意义(P <0.05,P<0.01);Hoechst 33258检测表明,30μmol/L胡桃醌处理细胞4,8,12h后可出现明显的细胞核典型凋亡细胞形态;细胞凋亡检测表明,30mol/L胡桃醌培养不同时间后,与对照组相比早期凋亡率明显增高;Western blotting检测显示,与正常对照组相比,30μmol/L胡桃醌处理细胞12h后,HeLa细胞Bcl-2,pAkt蛋白的表达明显降低,而Bax、Cleave-Caspase-3,Akt蛋白表达明显升高.结论 胡桃醌通过抑制PI3K/Akt通路,进而促进HeLa细胞凋亡.