目的 探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)对突触蛋白-Ⅰ磷酸化水平的影响及其在小鼠原代脑皮层神经元氧-糖剥夺(OGD)缺血损伤中作用.方法 借助cPKCγ基因敲除(cPKCγ-/-)小鼠,利用小鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)在体缺血模型和原代脑皮层神经元OGD离体细胞缺血模型,采用免疫共沉淀(Co-IP)、蛋白免疫印迹和免疫荧光等生物化学技术,验证cPKCγ与突触蛋白-Ⅰ的相互作用,探讨cPKCγ对突触蛋白-Ⅰ磷酸化水平的调节及小鼠原代脑皮层神经元OGD损伤后对神经元形态的影响.结果 免疫共沉淀结果证明,正常及缺血小鼠脑皮层组织中cPKCγ与突触蛋白-Ⅰ均存在相互作用;对突触蛋白-Ⅰ 5个可能的丝氨酸磷酸化位点进行筛选发现,只有Ser549和Ser553位点的磷酸化水平在OGD和cPKCγ敲除前后有明显变化;进一步统计分析得出,野生型(cPKCγ+/+)小鼠原代脑皮层神经元中,OGD处理使突触蛋白-Ⅰ Ser549和Ser553位点的磷酸化水平显著降低(每组n=5,与野生型常氧组相比P＜0.05),cPKCγ基因敲除可显著降低上述两个位点的磷酸化水平(每组n=5,与野生型常氧组相比P ＜0.05),而OGD处理后降低趋势更明显(每组n=5,与野生型OGD组相比P＜0.05);除此之外,OGD处理可使cPKCγ+/+和cPKCγ-/-脑皮层神经元突起的长度和数目均显著降低(每组n=8,与野生型常氧组相比
作者：朱弘倚；张楠；于津泠；魏海萍；韩松；李俊发
来源：解剖学报 2016 年 47卷 2期
