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目的 评价不同浓度的十二烷基磺酸钠(SDS)处理猪小肠黏膜下层(SIS)的脱细胞效果,筛选最佳脱细胞浓度,为组织工程化角膜上皮的制备提供支架材料.方法 配制0.1%、0.2%、0.3%、0.5% SDS随机分成A、B、C、D4组,分别脱细胞处理SIS 15min、30min、lh、2h(n =20),同时观察SIS的大体形态变化,HE和4,6一二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察脱细胞前后SIS的生物学特性,并对脱细胞支架进行基因组DNA分析(n=5).结果 脱细胞SIS肉眼观察呈乳白色、半透明的膜状物,具有一定的弹性、韧性及透光性;HE和DAPI染色光学显微镜观察结果显示,A组及B组处理30min时SIS生物支架无细胞及DNA残留,组织结构保留完整,胶原纤维间孔隙率增加;A组及B组处理30min脱细胞率可达90%以上.结论 0.1%及0.2% SDS处理30min条件下脱细胞效果较好,能更好地降低SIS的免疫原性,是SDS脱细胞处理SIS比较理想的浓度时间条件,为组织工程化角膜上皮的构建奠定理论基础.

作者:王付燕;杜立群

来源:解剖学报 2016 年 47卷 6期

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王付燕;杜立群
来源:
解剖学报 2016 年 47卷 6期
标签:
组织工程 支架材料 脱细胞 小肠黏膜下层 HE染色 DAPI染色 Tissue engineering Scaffold Decellularization Small intestinal submucosa HE staining DAPI staining
目的 评价不同浓度的十二烷基磺酸钠(SDS)处理猪小肠黏膜下层(SIS)的脱细胞效果,筛选最佳脱细胞浓度,为组织工程化角膜上皮的制备提供支架材料.方法 配制0.1%、0.2%、0.3%、0.5% SDS随机分成A、B、C、D4组,分别脱细胞处理SIS 15min、30min、lh、2h(n =20),同时观察SIS的大体形态变化,HE和4,6一二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察脱细胞前后SIS的生物学特性,并对脱细胞支架进行基因组DNA分析(n=5).结果 脱细胞SIS肉眼观察呈乳白色、半透明的膜状物,具有一定的弹性、韧性及透光性;HE和DAPI染色光学显微镜观察结果显示,A组及B组处理30min时SIS生物支架无细胞及DNA残留,组织结构保留完整,胶原纤维间孔隙率增加;A组及B组处理30min脱细胞率可达90%以上.结论 0.1%及0.2% SDS处理30min条件下脱细胞效果较好,能更好地降低SIS的免疫原性,是SDS脱细胞处理SIS比较理想的浓度时间条件,为组织工程化角膜上皮的构建奠定理论基础.