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目的 探讨NF-E2相关因子2(Nrf2)对糖尿病视网膜细胞及血管的保护作用.方法 8周龄雄性Nrf2+/+(野生型)和Nrf2-/-C57BL/6小鼠60只随机分为模型组和对照组,共4组,每组各15只.模型组小鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ,45mg/kg),连续注射5d;对照组小鼠注射同体积的枸橼酸缓冲液.模型组和对照组小鼠初次注射后每周测空腹血糖及体重,至第10周取视网膜.采用免疫印迹法检测视网膜内Nrf2激活的下游蛋白血红素加氧酶-1(HO-1)的表达情况;免疫荧光染色检测具有多种剪接形式的RNA结合蛋白(RBPMS)阳性的视网膜节细胞(RGCs)及胆碱乙酰转移酶(ChAT)阳性的无长突细胞(ACs)并计数;采用过碘酸-希夫和苏木素染色,观察视网膜内无细胞毛细血管并进行定量分析.结果 STZ诱导1周后,野生型和Nrf2-/-模型组小鼠血糖急剧升高,体重开始显著下降,随着周龄的增长体重无明显增加;对照组小鼠血糖值无明显升高,体重呈正常缓慢增长趋势.STZ诱导糖尿病10周后,RBPMS和ChAT染色发现,Nrf2-/-糖尿病小鼠视网膜内RGCs和ACs数量显著降低(P<0.05);过碘酸-希夫和苏木素染色显示,Nrf2-/-糖尿病小鼠视网膜内出现无细胞毛细血管;免疫印迹法显示,野生型小鼠模型组中Nrf2激活的下游蛋白HO-1表达升高.结论 Nrf2对糖尿病视网膜细胞及血管具有保护作用,其可能是通过

作者:张艳;何美华

来源:解剖学报 2017 年 48卷 5期

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作者:
张艳;何美华
来源:
解剖学报 2017 年 48卷 5期
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糖尿病 视网膜病变 NF-E2相关因子2 血红素加氧酶-1 免疫荧光 免疫印迹法 C57BL/6小鼠 Diabeties Retinopathy NF-E2 related factor 2 Heme oxygenase-1 Immunofluorescence Western blotting C57BL/6 mouse
目的 探讨NF-E2相关因子2(Nrf2)对糖尿病视网膜细胞及血管的保护作用.方法 8周龄雄性Nrf2+/+(野生型)和Nrf2-/-C57BL/6小鼠60只随机分为模型组和对照组,共4组,每组各15只.模型组小鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ,45mg/kg),连续注射5d;对照组小鼠注射同体积的枸橼酸缓冲液.模型组和对照组小鼠初次注射后每周测空腹血糖及体重,至第10周取视网膜.采用免疫印迹法检测视网膜内Nrf2激活的下游蛋白血红素加氧酶-1(HO-1)的表达情况;免疫荧光染色检测具有多种剪接形式的RNA结合蛋白(RBPMS)阳性的视网膜节细胞(RGCs)及胆碱乙酰转移酶(ChAT)阳性的无长突细胞(ACs)并计数;采用过碘酸-希夫和苏木素染色,观察视网膜内无细胞毛细血管并进行定量分析.结果 STZ诱导1周后,野生型和Nrf2-/-模型组小鼠血糖急剧升高,体重开始显著下降,随着周龄的增长体重无明显增加;对照组小鼠血糖值无明显升高,体重呈正常缓慢增长趋势.STZ诱导糖尿病10周后,RBPMS和ChAT染色发现,Nrf2-/-糖尿病小鼠视网膜内RGCs和ACs数量显著降低(P<0.05);过碘酸-希夫和苏木素染色显示,Nrf2-/-糖尿病小鼠视网膜内出现无细胞毛细血管;免疫印迹法显示,野生型小鼠模型组中Nrf2激活的下游蛋白HO-1表达升高.结论 Nrf2对糖尿病视网膜细胞及血管具有保护作用,其可能是通过