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目的 探讨低氧预处理对老年人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)促血管新生能力的影响,为改善老年患者自体干细胞移植治疗缺血性心肌损伤疗效提供支持.方法 老年hBMSCs经过低氧预处理后,倒置相差显微镜下摄片观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志物,并进行成骨、成脂诱导分化检测其分化潜能.随后收集青年hBMSCs常氧培养基(norCM),老年hBMSCs常氧和低氧培养基(hypoCM),分别为norCM-young、norCM-old和hypoCM-old 3组条件培养基,未加干细胞的等体积培养基为阴性对照(control)组.各组条件培养基分别处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs),用CCK-8法检测细胞存活率,用管状结构形成实验检测体外血管新生能力.BCA法检测各组条件培养基总蛋白含量,Western blotting技术检测细胞中及条件培养基中低氧诱导因子1 α(HIF-1α)含量.结果 低氧预处理对老年hBMSCs形态、表面标志物及分化潜能影响不显著(P>0.05,n≥3).HypoCM-old组与norCM-old组相比,低氧-复氧培养条件下HUVECs的存活率显著提高(P<0.05,n=5),HUVECs细胞管状结构形成能力也显著提高(P<0.01,n=5).HypoCM-old组总蛋白量显著高于norCM-old组(P<0.05,n=3),hypoCM-old组hBMSCs中HIF-1α表达量显著高于norCM-old组(P<0.05,n=3),同时hypoCM-old组培养基中HIF-1α的含量

作者:宋慧芳;谈佳音;刘阳;张卫国;郭蕊

来源:解剖学报 2022 年 53卷 1期

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作者:
宋慧芳;谈佳音;刘阳;张卫国;郭蕊
来源:
解剖学报 2022 年 53卷 1期
标签:
低氧预处理;低氧诱导因子1α;老龄;骨髓间充质干细胞;血管新生;免疫印迹法;人
目的 探讨低氧预处理对老年人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)促血管新生能力的影响,为改善老年患者自体干细胞移植治疗缺血性心肌损伤疗效提供支持.方法 老年hBMSCs经过低氧预处理后,倒置相差显微镜下摄片观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志物,并进行成骨、成脂诱导分化检测其分化潜能.随后收集青年hBMSCs常氧培养基(norCM),老年hBMSCs常氧和低氧培养基(hypoCM),分别为norCM-young、norCM-old和hypoCM-old 3组条件培养基,未加干细胞的等体积培养基为阴性对照(control)组.各组条件培养基分别处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs),用CCK-8法检测细胞存活率,用管状结构形成实验检测体外血管新生能力.BCA法检测各组条件培养基总蛋白含量,Western blotting技术检测细胞中及条件培养基中低氧诱导因子1 α(HIF-1α)含量.结果 低氧预处理对老年hBMSCs形态、表面标志物及分化潜能影响不显著(P>0.05,n≥3).HypoCM-old组与norCM-old组相比,低氧-复氧培养条件下HUVECs的存活率显著提高(P<0.05,n=5),HUVECs细胞管状结构形成能力也显著提高(P<0.01,n=5).HypoCM-old组总蛋白量显著高于norCM-old组(P<0.05,n=3),hypoCM-old组hBMSCs中HIF-1α表达量显著高于norCM-old组(P<0.05,n=3),同时hypoCM-old组培养基中HIF-1α的含量