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目的 探讨人乳头瘤毒(HPV)16早期基因E6和E7的表达对NIKS细胞凋亡表型的影响.方法 用含有HPV16的E6、HPV16E7、HPV16E6E7病毒癌基因的逆转录病毒感染角质生成细胞株NIKS,puromycin筛选稳定表达细胞:基因组PCR和Western blot方法验证E6和E7的表达;转染后的NIKS细胞用不同浓度的足叶乙甙处理,流式细胞仪和Annexin V染色检测细胞凋亡情况.结果 经逆转录病毒感染后,建立表达E6、E7及E6E7的NIKS细胞株,基因组PCR证明E6和E7整合入NIKS细胞基因组;Western blot证实表达的E6、E7具有生物学活性,能够分别降解p53和pRB:在足叶乙甙处理后,E6、E7以及E6E7表达细胞发生明显的细胞死亡,E6和E7具有叠加作用,且具有剂量依赖性,AnnexinV染色证实细胞发生凋亡,凋亡率分别为(33.5±3.2)
作者：刘灏；王岩；李颖钊；刘志国
来源：解剖学研究 2009 年 31卷 3期
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