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目的:探讨AD胞质杂交细胞的构建方法及其线粒体形态功能变化情况,为后续研究提供细胞模型.方法:利用融合剂将AD患者及健康老人血小板分别与线粒体DNA缺失细胞(ρ0细胞)进行融合,建立AD和对照细胞质杂交细胞,透射电镜及PCR法鉴定;透射电镜观察胞质杂交细胞线粒体结构;MTT检测细胞活力;荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧(ROS)水平.结果:ρ0细胞与血小板融合后重新出现线粒体和mtDNA;与同期对照组胞质杂交细胞比较,到培养晚期,AD胞质杂交细胞中异常线粒体显著增多,细胞活力明显降低,ROS水平明显增高.结论:成功构建出AD胞质杂交细胞和对照组胞质杂交细胞,为下一步的研究奠定了细胞模型基础.

作者:孔令平;刘妍;魏桂芬;李艳玲;张惠爱;汪华侨

来源:解剖学杂志 2013 年 36卷 3期

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作者:
孔令平;刘妍;魏桂芬;李艳玲;张惠爱;汪华侨
来源:
解剖学杂志 2013 年 36卷 3期
标签:
阿尔茨海默病 胞质杂交细胞 ρ0细胞 线粒体 Alzheimer's disease cybrids ρ0 cells mitochondria
目的:探讨AD胞质杂交细胞的构建方法及其线粒体形态功能变化情况,为后续研究提供细胞模型.方法:利用融合剂将AD患者及健康老人血小板分别与线粒体DNA缺失细胞(ρ0细胞)进行融合,建立AD和对照细胞质杂交细胞,透射电镜及PCR法鉴定;透射电镜观察胞质杂交细胞线粒体结构;MTT检测细胞活力;荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧(ROS)水平.结果:ρ0细胞与血小板融合后重新出现线粒体和mtDNA;与同期对照组胞质杂交细胞比较,到培养晚期,AD胞质杂交细胞中异常线粒体显著增多,细胞活力明显降低,ROS水平明显增高.结论:成功构建出AD胞质杂交细胞和对照组胞质杂交细胞,为下一步的研究奠定了细胞模型基础.