目的:研究自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对二氧化硅(SiO2)诱导的肺泡巨噬细胞自噬的激活,是否对自身分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β(TGF-β)产生影响.方法:收集SD雄性大鼠肺泡巨噬细胞灌洗液,将其随机分为对照组,SiO2刺激组(SiO2组),自噬抑制剂组(3-MA组).采用体外暴露肺泡巨噬细胞染尘法,染尘成功后12 h给予10 mmol/L 3-MA干预.分别于干预后6、18、24h和36 h用胰酶消化并收集体外培养的肺泡巨噬细胞.采用H-E染色观察肺泡巨噬细胞形态学改变;免疫细胞化学检测肺泡巨噬细胞中TNF-α和TGF-β的定位表达;免疫印迹检测肺泡巨噬细胞中TNF-α和TGF-β的蛋白定量.结果:SiO2组与对照组相比肺泡巨噬细胞体积增大,胞质丰富,部分细胞胞质内可见矽尘吞噬颗粒.3-MA组较SiO2组肺泡巨噬细胞形态改变减轻.与对照组相比,SiO2组各时间相肺泡巨噬细胞中TNF-α和TGF-β的蛋白表达显著升高,于SiO2刺激后6h开始升高,18h达高峰,24 h与36 h回落,但仍高于对照组水平.3-MA组可以显著下调SiO2组对应时间点肺泡巨噬细胞中TNF-α和TGF-β的表达.结论:自噬抑制剂3-MA抑制肺泡巨噬细胞自噬后可以下调肺泡巨噬细胞中TNF-α和TGF-β的表达及释放,进而促进炎症损伤的修复.
作者：朱会兴；高俊玲；赵曼曼；李冉；田艳霞；王鑫；张娟；崔建忠
来源：解剖学杂志 2015 年 38卷 1期
