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目的构建汉滩病毒DNA疫苗,考查小鼠鼻内接种DNA疫苗后的基因组织定位及表达动力学,为进一步研究汉滩病毒DNA疫苗粘膜免疫的疗效作前期准备.方法采用PCR法从PJSA1175-S质粒扩增汉滩病毒的S基因片段后装入PcDNA3.1B(-)载体,并以此候选DNA疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠,在不同时间、不同部位取其组织抽提基因组DNA和组织总RNA,用PCR及RT-PCR检测质粒的分布和表达动力学.结果构建了汉滩病毒DNA疫苗PcDNA3.1B-S1.3.免疫接种该疫苗第1天后在小鼠鼻咽、肺、肾、肝、脾、小肠等组织中均有质粒分布;第1周内上述组织中均可检测到特异mRNA,第2周起小肠、肝及肾中特异mRNA消失.结论成功构建了PcDNA3.1B-S1.3DNA疫苗,构建的疫苗滴鼻免疫后在小鼠体内得到广泛的分布及表达.
作者：石永兵；诸葛洪祥；金东华；许菊；钱峰；张学光
来源：江苏医药 2004 年 30卷 6期
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