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目的 探讨不同浓度尿酸对人类髓核细胞(HNPC)生物学功能的影响.方法 体外不同浓度尿酸条件下培养HNPC,采用CCK-8法检测不同浓度尿酸对HNPC的抑制率.分别采用不同浓度(0、100、200、400 μmol/L)尿酸培养HNPC 1周或2周,TUNEL荧光评估HNPC凋亡水平,qRT-PCR及免疫组织化学染色检测HNPC细胞外基质Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达,Western blot法检测凋亡相关蛋白和自噬相关蛋白的表达.结果 随着尿酸浓度的增加,HNPC活力呈递减趋势.培养1周后,与尿酸0μmol/L比较,尿酸400 μmol/L HNPC中凋亡细胞比例和切割型Caspase-3、Beclin1、微管相关蛋白轻链3(LC3)Ⅱ/LC3 Ⅰ比值表达增高(P<0.05),而p62蛋白、Ⅱ型胶原及聚集蛋白聚糖mRNA和蛋白表达降低(P<0.05);培养2周后,与尿酸0 μmol/L比较,尿酸200μmol/L、尿酸400 μmol/L上述指标改变均较显著(P<0.05).结论 高浓度尿酸可以促进HNPC凋亡以及自噬,减少HNPC细胞外基质表达,进而加重椎间盘退变.

作者:胡旭琪;陆惠根;俞叶锋;胡民结;潘学康;徐思琪

来源:江苏医药 2023 年 49卷 4期

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作者:
胡旭琪;陆惠根;俞叶锋;胡民结;潘学康;徐思琪
来源:
江苏医药 2023 年 49卷 4期
标签:
尿酸 椎间盘退变 人类髓核细胞 自噬 凋亡
目的 探讨不同浓度尿酸对人类髓核细胞(HNPC)生物学功能的影响.方法 体外不同浓度尿酸条件下培养HNPC,采用CCK-8法检测不同浓度尿酸对HNPC的抑制率.分别采用不同浓度(0、100、200、400 μmol/L)尿酸培养HNPC 1周或2周,TUNEL荧光评估HNPC凋亡水平,qRT-PCR及免疫组织化学染色检测HNPC细胞外基质Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达,Western blot法检测凋亡相关蛋白和自噬相关蛋白的表达.结果 随着尿酸浓度的增加,HNPC活力呈递减趋势.培养1周后,与尿酸0μmol/L比较,尿酸400 μmol/L HNPC中凋亡细胞比例和切割型Caspase-3、Beclin1、微管相关蛋白轻链3(LC3)Ⅱ/LC3 Ⅰ比值表达增高(P<0.05),而p62蛋白、Ⅱ型胶原及聚集蛋白聚糖mRNA和蛋白表达降低(P<0.05);培养2周后,与尿酸0 μmol/L比较,尿酸200μmol/L、尿酸400 μmol/L上述指标改变均较显著(P<0.05).结论 高浓度尿酸可以促进HNPC凋亡以及自噬,减少HNPC细胞外基质表达,进而加重椎间盘退变.