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香菇Lentinula edodes是我国食用菌年产量最大的单品,优化香菇原生质体的制备条件,获得高质量、高活力的原生质体可以为香菇育种和遗传多样性分析提供技术保障.本研究利用单因素试验对稳渗剂浓度、酶解液类型、酶解时间、酶解温度4个因素的最优作用条件和相关性进行检验和筛选;依据单因素试验的结果,对酶解时间、酶解温度、酶解液种类进行响应面法3因素3水平试验优化分析.单因素试验结果表明,使用2％的溶壁酶+蜗牛酶+纤维素酶混合酶制剂为酶解液、0.6 mol/L甘露醇为稳渗剂的效果显著高于其他处理(P＜0.05).经Box-Behnken设计得出香菇原生质体最佳制备条件为酶解时间3.25 h,酶解液浓度1.7％,酶解温度30.49℃,获得原生质体产量为14.02×106 CFU/mL,与理论产量(13.862×106 CFU/mL)偏差小,可为后续原生质体融合育种和多样性分析提供重要基础.
作者：孙佳星；杨红；孙晓东；郝然；张伟东；吕国忠
来源：菌物学报 2022 年 41卷 5期
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