目的 探讨miR-455-3p调控沉默信息调节因子 2 同源蛋白 1(silent mating type information regulation 2 homolog 1,sirt1)表达对大鼠椎间盘髓核(nucleus pulposus,NP)细胞增殖及凋亡的影响.方法 采用Ⅱ型胶原酶从大鼠腰椎椎间盘中分离NP细胞,并用甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原(Collagen Ⅱ)免疫荧光染色对其鉴定.NP细胞分成Ctrl组、白细胞介素-1 β(interleukin-1 β,IL-1 β)组、IL-1β+NC inhibitor组、IL-1β+miR-455-3p inhibitor组、IL-1β+miR-455-3p inhibitor+si-NC组、IL-1 β+miR-455-3p inhibitor+si-sirt1 组,除Ctrl组外的五组细胞均使用 10 ng/mL的IL-1 β诱导NP细胞退变模型.实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测miR-455-3p及sirt1 mRNA水平;细胞计数试剂盒 8(cell counting kit 8,CCK-8)检测增殖;JC-1 染色检测线粒体膜电位;Hoechst染色检测凋亡;蛋白免疫印迹检测sirt1、增殖(PCNA、Ki67、Cyclin D1)和凋亡(Bcl-2、Bax、Cleaved-caspase 3)相关蛋白及Collagen Ⅱ、Aggrecan表达;双荧光素酶报告分析实验验证miR-455-3p与sirt1 的靶向关系.结果 大鼠椎间盘NP细胞被成功分离.与IL-1 β组、IL-1β+NC inhibitor组比较,IL-1β+miR-4

作者：唐家国；李晨芳；左斌；何精选；夏晓枫；王鹏；邹凯；娄文杰

来源：颈腰痛杂志 2024 年 45卷 1期