本文根据GenBank中已登录的蜡蚧蚧霉Lecanicillium lecanii,粉棒束孢Isaria farinosa,球孢白僵菌Beauveria bassiana和金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae的几丁质酶基因序列的同源性比较,以它们高度保守的核苷酸序列设计一对引物,采用RT-PCR和3′/5′-RACE相结合的方法,首次从玫烟色棒束孢Isaria fumosorosea中克隆出几丁质酶Ifuchi1全长cDNA基因.其全序列长为1 542 bp,编码阅读框由1 275个核苷酸组成,5′非翻译区(5′-UTR)与3′非翻译区(3′-UTR)分别为33个核苷酸和234个核苷酸.基因编码424个氨基酸,信号肽长度为24个氨基酸,成熟蛋白理论分子量为47.6 kDa,理论等电点为4.89.该蛋白可归于几丁质酶18族V类.运用制备芽生孢子转化法将Ifuchi1基因导入球孢白僵菌.最适产酶时间36 h条件下,挑选的转基因菌株的几丁质酶活性相对于野生型菌株提高了86.2
作者:汤强;章玉萍;谢翎;宋礼华;李增智;黄勃
来源:昆虫学报 2009 年 52卷 7期