[目的]Novel-31*是在家蚕质型多角体病毒(Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus,BmCPV)感染的家蚕中发现的一个差异表达miRNA.本研究旨在验证Novel-31*对其靶基因表达的调控作用,以便进一步研究miRNA及其靶基因在昆虫免疫调节中的作用.[方法]用生物信息学方法预测Novel-31 *的靶基因,荧光定量PCR分析Novel-31 *及其靶基因在家蚕感染BmCPV后不同时间点的表达变化;构建miRNA慢病毒表达载体和靶基因慢病毒表达载体,转染293T细胞,同时合成Novel-31*mimics转染家蚕培养细胞BmN,使用荧光定量PCR检测Novel-31 *对靶基因表达的调控作用.[结果]生物信息学方法预测发现,溶血素基因是Novel-31*的靶基因,其结合位点位于溶血素基因的5 ' UTR区域.荧光定量PCR分析表明,Novel-31 *及溶血素基因在感染BmCPV的家蚕血淋巴细胞中呈现明显的上调表达.荧光定量PCR检测表明,在Novel-31 *慢病毒表达载体和溶血素基因5 'UTR慢病毒表达载体转染的293T细胞中和在转染Novel-31*mimics的家蚕BmN细胞中,溶血素基因都上调表达.[结论]溶血素基因是miRNA Novel-31*的靶基因,Novel-31*与溶血素基因5'UTR结合,上调溶血素基因的表达.
作者：施莉莉；耿涛；吴萍；潘中华；覃光星；高坤；侯成香；郭锡杰
来源：昆虫学报 2016 年 59卷 7期
