[目的]在活体水平验证飞蝗Locusta migratoria羧酸酯酶基因LmCesA1和LmCesA2是否参与有机磷杀虫剂的代谢解毒.[方法]采用Gal4/UAS系统,借助转基因技术,构建两个转基因黑腹果蝇Drosophila melanogaster品系,选取3品系Gal4(act-Gal4,tub-Gal4和c601-Gal4)果蝇作为母本分别与两种转基因果蝇(UAS-LmCesA1和UAS-LmCesA2)以及一种亲本对照果蝇(RB0006{y v;attP40,y+})进行杂交.对子一代转基因果蝇从DNA和RNA水平进行验证,筛选出成功构建的品系.采用生物测定方法检测转基因果蝇与Gal4果蝇杂交后代对马拉硫磷的抗性.[结果]转基因果蝇DNA水平鉴定结果显示,转基因果蝇tub＞ LmCesA1和tub＞ LmCesA2中分别扩增到目的基因LmCesA1和LmCesA2,而对照组果蝇tub＞ attP40中未扩增到目的基因.转基因果蝇RNA水平的检测结果显示,这两个基因在相应的杂交后代中均有表达,表明转基因果蝇构建成功.目的基因在转基因果蝇成虫不同组织中的表达结果表明,两个目的基因LmCesA1和LmCesA2分别在转基因果蝇c601＞LmCesA1和c601＞LmCesA2的肠道中高表达;LmCesA1在c601＞LmCesA1果蝇肠道中的表达量分别是脑和表皮中的7.6和16.7倍,LmCesA2在c601＞LmCesA2果蝇肠道中的表达量分别是脑和表皮中的5.4和10.9倍.杀虫剂生物测定结果显示,与对照组果

作者：尹菲；杨洋；张徐波；张建珍；张建琴

来源：昆虫学报 2020 年 63卷 7期