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【目的】克隆朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus几丁质合成过程中的关键酶几丁质合成酶基因,并检测该基因在朱砂叶螨生长发育不同阶段的相对表达量。【方法】本研究采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)以及 cDNA 末端快速扩增(RACE)技术首次克隆获得朱砂叶螨几丁质合成酶基因1的全长cDNA序列(命名为TcCHS1,GenBank登录号为KM242062),并使用实时荧光定量PCR技术首次检测了TcCHS1基因在朱砂叶螨生长发育不同阶段的相对表达量。【结果】朱砂叶螨TcCHS1基因的cDNA全长为4881 bp,包括198 bp 的5¢非翻译区(5¢-UTR),4425 bp的开放阅读框(ORF),258 bp的3¢非翻译区(3¢-UTR),开放阅读框编码1474个氨基酸,预测其蛋白质分子质量约为168.35 ku,理论等电点为6.26。其包含EDR和QRRRW这2个几丁质合成酶基因的标签序列。氨基酸序列同源性分析结果表明:TcCHS1与其他昆虫该基因编码蛋白的氨基酸序列相似度在50

作者:辛天蓉;邹智勇;闵强;李雷;吴轩德;王雅瑜;邹志文;夏斌

来源:应用昆虫学报 2015 年 3期

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作者:
辛天蓉;邹智勇;闵强;李雷;吴轩德;王雅瑜;邹志文;夏斌
来源:
应用昆虫学报 2015 年 3期
标签:
朱砂叶螨 几丁质合成酶 基因克隆 表达 Tetranychus cinnabarinus chitin synthase gene cloning expression
【目的】克隆朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus几丁质合成过程中的关键酶几丁质合成酶基因,并检测该基因在朱砂叶螨生长发育不同阶段的相对表达量。【方法】本研究采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)以及 cDNA 末端快速扩增(RACE)技术首次克隆获得朱砂叶螨几丁质合成酶基因1的全长cDNA序列(命名为TcCHS1,GenBank登录号为KM242062),并使用实时荧光定量PCR技术首次检测了TcCHS1基因在朱砂叶螨生长发育不同阶段的相对表达量。【结果】朱砂叶螨TcCHS1基因的cDNA全长为4881 bp,包括198 bp 的5¢非翻译区(5¢-UTR),4425 bp的开放阅读框(ORF),258 bp的3¢非翻译区(3¢-UTR),开放阅读框编码1474个氨基酸,预测其蛋白质分子质量约为168.35 ku,理论等电点为6.26。其包含EDR和QRRRW这2个几丁质合成酶基因的标签序列。氨基酸序列同源性分析结果表明:TcCHS1与其他昆虫该基因编码蛋白的氨基酸序列相似度在50