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【目的】将 RNA 干扰应用于害虫防治领域,通过饲喂表达 dsRNA 的转基因植物或表达 dsRNA的细菌,可沉默特定基因进而控制害虫,为农业害虫防治开辟一个新领域。而表达 dsRNA 的细菌能否有效储存是决定此项技术实际应用的关键。【方法】用﹣20℃冻存的表达马铃薯甲虫腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHase)dsRNA 的大肠杆菌 E.coli,饲喂马铃薯甲虫 Leptinotarsa decemlineata(Say)2龄幼虫,检测不同时间储存、灭活与否的活性变化,明确其储存条件。【结果】大肠杆菌﹣20℃储存24 h 后生物活性优于新鲜菌,储存48 h 后效果减弱,而载体大肠杆菌是否灭活对活性影响不大。【结论】 dsRNA 大肠杆菌发酵液在﹣20℃条件下可以短暂储存。

作者:李晓旭;付开赟;李国清;王刚;吐尔逊;何江;郭文超

来源:应用昆虫学报 2015 年 5期

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作者:
李晓旭;付开赟;李国清;王刚;吐尔逊;何江;郭文超
来源:
应用昆虫学报 2015 年 5期
标签:
马铃薯甲虫 腺苷高半胱氨酸水解酶 dsRNA RNA 干扰 储存条件 Leptinotarsa decemlineata S-adenosyl-L-homocysteine hydrolase dsRNA RNAi storage conditions
【目的】将 RNA 干扰应用于害虫防治领域,通过饲喂表达 dsRNA 的转基因植物或表达 dsRNA的细菌,可沉默特定基因进而控制害虫,为农业害虫防治开辟一个新领域。而表达 dsRNA 的细菌能否有效储存是决定此项技术实际应用的关键。【方法】用﹣20℃冻存的表达马铃薯甲虫腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHase)dsRNA 的大肠杆菌 E.coli,饲喂马铃薯甲虫 Leptinotarsa decemlineata(Say)2龄幼虫,检测不同时间储存、灭活与否的活性变化,明确其储存条件。【结果】大肠杆菌﹣20℃储存24 h 后生物活性优于新鲜菌,储存48 h 后效果减弱,而载体大肠杆菌是否灭活对活性影响不大。【结论】 dsRNA 大肠杆菌发酵液在﹣20℃条件下可以短暂储存。