目的 探索神经生长因子受体介导的黑色素瘤抗原编码基因同源蛋白(NRAGE)对人牙髓细胞(hDPCs)和小鼠成牙本质细胞(MDPC-23)细胞增殖的影响.方法 重组慢病毒转染细胞稳定敲除hDPCs和MDPC-23的NRAGE表达,体外组织块法原代培养hDPCs和MDPC-23,进而检测NRAGE对hDPCs和MDPC-23的增殖影响.采用CCK-8法分析NRAGE对hD-PCs和MDPC-2细胞增殖的影响,流式细胞术分析NRAGE对hDPCs和MDPC-23的细胞周期分布和细胞凋亡影响.免疫荧光法检测NRAGE和NF-κB的表达和定位,分析NF-κB蛋白表达水平,并用IKK抑制剂处理细胞后,分析细胞周期和细胞凋亡.结果 重组慢病毒转染后NRAGE的mRNA和蛋白水平下降显着.NRAGE敲减后抑制了hDPCs和MDPC-23的增殖活性和凋亡.NRAGE敲减后显示hDPCs的G0G1期滞留显著,而对MDPC-23没有影响.同时,NRAGE敲减后激活NF-κB信号通路.IKK抑制剂可以抑制NRAGE敲除后对hDPCs和MDPC-23的细胞凋亡的抑制作用.结论 NRAGE敲减后抑制牙髓细胞的增殖活性.NRAGE通过NF-κB信号通路调控hDPCs的细胞周期和凋亡.
作者:陆梦婷;颜娅楠;唐凤勤;祁胜财;张旭;徐远志
来源:口腔医学 2016 年 36卷 12期