[目的]探讨镉致人支气管上皮(16HBE)细胞恶性转化中细胞周期的变化,分析去甲基化处理后细胞周期蛋白基因(CyclinD1)的表达情况. [方法]采用流式细胞术检测正常16HBE细胞和氯化镉恶性转化16HBE细胞不同阶段(第5、15、35代细胞)及镉恶性转化第35代细胞接种裸鼠成瘤细胞(简称成瘤细胞)的细胞周期变化情况;采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot法检测上述细胞及经去甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-dC)处理后的成瘤细胞CyclinD1的mRNA和蛋白表达情况. [结果]与正常16HBE细胞比较,氯化镉恶性转化16HBE细胞系第35代细胞及成瘤细胞在G0/G1期的细胞比例随着转化代数的增加而增大,分别为60.04%、64.12%;而在S期和G2/M期细胞比例则随着转化代数的增加而减少——在S期细胞比例分别为35.03%、31.83%,在G2/M期分别为4.93%、4.01%——差异均有统计学意义(均P<0.05).与正常16HBE细胞相比,氯化镉恶性转化16HBE细胞不同阶段(第5、15、35代细胞及成瘤细胞)的CyclinD1的mRNA和蛋白表达量呈现随着代数增加而上调的趋势;其中第35代细胞(2.34倍和2.41倍)及成瘤细胞(2.33倍和2.35倍)明显增加(均P<0.05);5-Aza-dC处理后,成瘤细胞的CyclinD1的mRNA和蛋白表达增加量有所下降,分别为处理前16HBE细胞的1.81
作者:黄钦海;周志衡;雷毅雄
来源:环境与职业医学 2014 年 31卷 3期