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[目的]探讨核因子E2相关因子2(Nr-2)在纳米二氧化硅(nano-SiO2)致人支气管上皮细胞(16HBE)氧化应激损伤中的作用.[方法]分别以终浓度为1.0、2.5、5.0、10.0、25.0和50.0 μg/mL nano-SiO2处理人支气管上皮细胞24h,检测细胞活性.根据检测结果,确定本实验nano-SiO2(粒径15mm)的暴露浓度为2.5、5.0和10.0 μg/mL,分别设定为低、中、高浓度组.检测各暴露浓度组细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等氧化应激相关指标.Western Blotting检测细胞总蛋白和核蛋白中Nrf-2的表达水平,同时采用实时荧光定量聚合酶链反应检测Nrf-2基因mRNA表达水平. [结果]中、高浓度nano-SiO2组16HBE胞内ROS水平明显增高(P<0.01),同时T-SOD和GSH-Px含量降低(P<0.05);各浓度nano-SiO2组16HBE胞内MDA含量均明显增高(P<0.05).与对照组相比,随着nano-SiO2暴露浓度的增高,细胞总Nrf-2蛋白和Nrf-2基因的表达水平呈先增高后降低的趋势,而核内Nrf-2蛋白表达水平均明显增高. [结论]15nm粒径的SiO2可诱导人支气管上皮细胞发生氧化应激性损伤,而Nrf-2的激活和核转位在调节细胞内氧化-抗氧化体系中起重要作用.

作者:范玉兰;陶功华;肖萍;龚春梅;洪新宇;帅怡;郑卫东;孙静秋

来源:环境与职业医学 2014 年 31卷 4期

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作者:
范玉兰;陶功华;肖萍;龚春梅;洪新宇;帅怡;郑卫东;孙静秋
来源:
环境与职业医学 2014 年 31卷 4期
标签:
核因子E2相关因子2 纳米二氧化硅 人支气管上皮细胞 氧化应激 损伤 nuclear factor E2-related factor 2 silica nanoparticle human bronchial epithelial cell oxidative stress damage
[目的]探讨核因子E2相关因子2(Nr-2)在纳米二氧化硅(nano-SiO2)致人支气管上皮细胞(16HBE)氧化应激损伤中的作用.[方法]分别以终浓度为1.0、2.5、5.0、10.0、25.0和50.0 μg/mL nano-SiO2处理人支气管上皮细胞24h,检测细胞活性.根据检测结果,确定本实验nano-SiO2(粒径15mm)的暴露浓度为2.5、5.0和10.0 μg/mL,分别设定为低、中、高浓度组.检测各暴露浓度组细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等氧化应激相关指标.Western Blotting检测细胞总蛋白和核蛋白中Nrf-2的表达水平,同时采用实时荧光定量聚合酶链反应检测Nrf-2基因mRNA表达水平. [结果]中、高浓度nano-SiO2组16HBE胞内ROS水平明显增高(P<0.01),同时T-SOD和GSH-Px含量降低(P<0.05);各浓度nano-SiO2组16HBE胞内MDA含量均明显增高(P<0.05).与对照组相比,随着nano-SiO2暴露浓度的增高,细胞总Nrf-2蛋白和Nrf-2基因的表达水平呈先增高后降低的趋势,而核内Nrf-2蛋白表达水平均明显增高. [结论]15nm粒径的SiO2可诱导人支气管上皮细胞发生氧化应激性损伤,而Nrf-2的激活和核转位在调节细胞内氧化-抗氧化体系中起重要作用.