[目的]观察煤尘通过单核细胞源性巨噬细胞致人胚肺成纤维细胞MRC-5纤维化改变过程中,胸腺分化抗原-1(Thy-1)表达及其DNA甲基化变化. [方法]用含500 nmol/L佛波酯的1640培养液培养人单核细胞,24h诱导分化后成巨噬细胞;收集100μg/mL煤尘刺激巨噬细胞24h的培养上清,再刺激MRC-5 24、48、72h,对照组分别为正常巨噬细胞和正常人胚肺成纤维细胞.酶联免疫分析法测定巨噬细胞上清液中IL-6、TGFβ1蛋白表达水平和MRC-5中TC F-β1蛋白表达水平,实时荧光定量PCR法检测胶原蛋白-Ⅰ、胶原蛋白-Ⅲ、α-SMA、Thy-1、DNA甲基化转移酶(DNMTs)1、3a、3b mRNA的表达,巢式降落式特异性PCR检测Thy-1DNA甲基化. [结果]煤尘组巨噬细胞上清中IL-6、TGF-β1蛋白表达水平与对照组比较明显增加[(5.542±0.953)ng/mLvs(2.498±0.456)ng/mL,(462.435±56.620) ng/Lvs(329.971±17.911)ng/L](P＜ 0.05);巨噬细胞染尘后上清刺激MRC-5 24、48、72h,TGF-β1蛋白表达[(223.813±5.723),(263.757±17.254),(326.720±11.263)ng/L]和胶原蛋白Ⅰ mRNA表达(3.38±0.37,3.87±0.28,4.40±0.10)、胶原蛋白ⅢmRNA表达(1.65 ±0.12,2.37±0.19,2.66±0.28)、a-SMA mRNA表达(2.41±0.47,4.76±0.10,4.23±0.63)均升高;且均存在时间效应关系,r值分别

作者：魏丛慧；王瑶；王凯；王和静；张庆锋；刘志宏

来源：环境与职业医学 2016 年 33卷 8期