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[目的]探讨磷脂肌醇3-激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002对胃癌细胞MGC-803的PI3K/丝-苏氨酸蛋白激酶(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路活性及细胞株生物学行为的影响.[方法] 12.5、25、50μrnol/L LY294002作用于胃癌细胞MGC-803(实验组),分别应用实时荧光定量PCR和Western blot检测PI3K/AKT/mTOR通路中关键信号分子PTEN、PI3K、AKT、mTOR、P70S6K、4EBP的mRNA和蛋白的表达情况;同时通过MTT实验、流武细胞术,测定LY294002对胃癌细胞MGC-803的增殖、细胞周期和凋亡的影响.[结果]实验组的PI3K、PTEN、AKT、mTOR、4EBP、P70S6K基因的mRNA相对表达量与对照组(二甲基亚砜)相比,差异有统计学意义(P<0.05),且AKT、mTOR、4EBP、P70S6K的表达量随着LY294002浓度升高而逐渐下降.LY294002对MGC-803细胞AKT、p-mTOR、p-70S6K、p-AKT蛋白的表达有明显抑制作用,且p-mTOR、p-70S6K、p-AKT蛋白的表达随着LY294002浓度升高而逐渐下降.MTT实验结果显示,LY294002对MGC-803细胞的增殖有明显的抑制作用,增殖率随LY294002浓度升高而逐渐降低(F=26.15,P<0.01).细胞周期实验结果显示,加入LY294002的MGC-803细胞相比于对照组细胞的G0/G1期比例较高(F=358.594,P< 0.001).凋亡实验显示,LY294002组的凋亡率高于对照组且凋

作者:徐余超;陈晓伟;孙海翔;赵颖;张文文;刘梦琪;沈孝兵

来源:环境与职业医学 2017 年 34卷 5期

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徐余超;陈晓伟;孙海翔;赵颖;张文文;刘梦琪;沈孝兵
来源:
环境与职业医学 2017 年 34卷 5期
标签:
MGC-803细胞 PI3K/AKT/mTOR信号通路 LY294002 胃癌 MGC-803 cell PI3K/AKT/mTOR signaling pathway LY294002 gastric cancer
[目的]探讨磷脂肌醇3-激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002对胃癌细胞MGC-803的PI3K/丝-苏氨酸蛋白激酶(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路活性及细胞株生物学行为的影响.[方法] 12.5、25、50μrnol/L LY294002作用于胃癌细胞MGC-803(实验组),分别应用实时荧光定量PCR和Western blot检测PI3K/AKT/mTOR通路中关键信号分子PTEN、PI3K、AKT、mTOR、P70S6K、4EBP的mRNA和蛋白的表达情况;同时通过MTT实验、流武细胞术,测定LY294002对胃癌细胞MGC-803的增殖、细胞周期和凋亡的影响.[结果]实验组的PI3K、PTEN、AKT、mTOR、4EBP、P70S6K基因的mRNA相对表达量与对照组(二甲基亚砜)相比,差异有统计学意义(P<0.05),且AKT、mTOR、4EBP、P70S6K的表达量随着LY294002浓度升高而逐渐下降.LY294002对MGC-803细胞AKT、p-mTOR、p-70S6K、p-AKT蛋白的表达有明显抑制作用,且p-mTOR、p-70S6K、p-AKT蛋白的表达随着LY294002浓度升高而逐渐下降.MTT实验结果显示,LY294002对MGC-803细胞的增殖有明显的抑制作用,增殖率随LY294002浓度升高而逐渐降低(F=26.15,P<0.01).细胞周期实验结果显示,加入LY294002的MGC-803细胞相比于对照组细胞的G0/G1期比例较高(F=358.594,P< 0.001).凋亡实验显示,LY294002组的凋亡率高于对照组且凋