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[背景]邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)是一种与代谢性疾病有关的内分泌干扰物,广泛应用于塑料制品中.暴露于DINP与包括非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)在内的几种肝脏不良健康结局的发展有关. [目的]探讨DINP暴露对人肝癌细胞(HepG2细胞)脂质代谢的影响及其可能的分子机制. [方法]首先,对HepG2细胞进行不同时间(24、48和 72 h)、不同剂量(0、0.003、0.01、0.03、0.1、0.3、1、3、10、30和 100 mmol·L-1)的DINP处理,采用细胞计数试剂盒 8(CCK8)检测细胞活力;通过油红O染色及脂质含量测定细胞内的脂质沉积情况,并进一步检测甘油三酯(TG)和胆固醇(TC)含量;最后通过荧光定量PCR检测脂肪酸合成相关基因乙酰辅酶A羧化酶α(Accα)、脂肪酸合成酶(Fasn)、丙二酰辅酶A脱羧酶(Mlycd)、固醇调节元件结合蛋白1(Srebp1),以及β-氧化相关基因过氧化物酶体增殖活化受体α(Pparα)、腺苷酸活化蛋白激酶(Ampk)、肉毒碱棕榈酰基转移酶 1A(Cpt-1a)、线粒体转录因子A(Tfam)、核呼吸因子1(Nrf1)、过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子1α(Pgc1-α)的mRNA表达水平. [结果]与对照组(0 mmol·L-1)相比,DINP暴露 24、48和 72 h后,HepG2细胞活力的未观察到有害作用水平(NOAEL)分别为 0.3、0.1和 0.1 mmol·L-1,观察到有害作用最低水平(LO

作者:王新静;秦逸华;武美琼;王莉

来源:环境与职业医学 2024 年 41卷 1期

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作者:
王新静;秦逸华;武美琼;王莉
来源:
环境与职业医学 2024 年 41卷 1期
标签:
邻苯二甲酸二异壬酯 HepG2细胞 脂质代谢 脂质合成 β-氧化 diisononyl phthalate HepG2 cell lipid metabolism lipid synthesis β-oxidation
[背景]邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)是一种与代谢性疾病有关的内分泌干扰物,广泛应用于塑料制品中.暴露于DINP与包括非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)在内的几种肝脏不良健康结局的发展有关. [目的]探讨DINP暴露对人肝癌细胞(HepG2细胞)脂质代谢的影响及其可能的分子机制. [方法]首先,对HepG2细胞进行不同时间(24、48和 72 h)、不同剂量(0、0.003、0.01、0.03、0.1、0.3、1、3、10、30和 100 mmol·L-1)的DINP处理,采用细胞计数试剂盒 8(CCK8)检测细胞活力;通过油红O染色及脂质含量测定细胞内的脂质沉积情况,并进一步检测甘油三酯(TG)和胆固醇(TC)含量;最后通过荧光定量PCR检测脂肪酸合成相关基因乙酰辅酶A羧化酶α(Accα)、脂肪酸合成酶(Fasn)、丙二酰辅酶A脱羧酶(Mlycd)、固醇调节元件结合蛋白1(Srebp1),以及β-氧化相关基因过氧化物酶体增殖活化受体α(Pparα)、腺苷酸活化蛋白激酶(Ampk)、肉毒碱棕榈酰基转移酶 1A(Cpt-1a)、线粒体转录因子A(Tfam)、核呼吸因子1(Nrf1)、过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子1α(Pgc1-α)的mRNA表达水平. [结果]与对照组(0 mmol·L-1)相比,DINP暴露 24、48和 72 h后,HepG2细胞活力的未观察到有害作用水平(NOAEL)分别为 0.3、0.1和 0.1 mmol·L-1,观察到有害作用最低水平(LO