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目的探索辐射诱导基因调控序列启动造血生长因子基因表达及观察其对造血恢复的作用.方法本实验将带有Egr-1调控序列启动的FLT3配基(FL)和EGFP双顺反子基因表达载体(Egr-EF)转染骨髓基质细胞系HFCL(称HFCL/EF);用RT-PCR鉴定细胞内目的基因的mRNA表达;采用FACS观察EGFP绿色荧光表达的阳性细胞;用ELISA方法检测HFCL/EF细胞培养上清FL的含量;观察HFCL/EF培养上清液对CD34+细胞的增殖作用.结果在HFCL/EF细胞中证实有外源性基因EGFP和FL的整合和表达,在辐照16h后的HFCL/EF细胞培养上清液中表明FL含量较照射前明显增高(P<0.01);同时证实辐射10d后HFCL/EF培养上清液对CD34+造血祖细胞的作用较辐射前具有明显的扩增作用(P<0.01).结论Egr-1调控序列启动的造血生长因子基因在辐射后表达明显增高并促进造血祖细胞增殖作用.

作者:杜楠;裴雪涛;罗成基;李梁;邹仲敏;冯凯;白慈贤

来源:免疫学杂志 2000 年 16卷 3期

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作者:
杜楠;裴雪涛;罗成基;李梁;邹仲敏;冯凯;白慈贤
来源:
免疫学杂志 2000 年 16卷 3期
标签:
辐射诱导基因 造血生长因子 基因治疗 辐射 骨髓基质细胞 hematopoietic growth factor radiation inducible gene gene therapy radiation bone marrow stromal cell
目的探索辐射诱导基因调控序列启动造血生长因子基因表达及观察其对造血恢复的作用.方法本实验将带有Egr-1调控序列启动的FLT3配基(FL)和EGFP双顺反子基因表达载体(Egr-EF)转染骨髓基质细胞系HFCL(称HFCL/EF);用RT-PCR鉴定细胞内目的基因的mRNA表达;采用FACS观察EGFP绿色荧光表达的阳性细胞;用ELISA方法检测HFCL/EF细胞培养上清FL的含量;观察HFCL/EF培养上清液对CD34+细胞的增殖作用.结果在HFCL/EF细胞中证实有外源性基因EGFP和FL的整合和表达,在辐照16h后的HFCL/EF细胞培养上清液中表明FL含量较照射前明显增高(P<0.01);同时证实辐射10d后HFCL/EF培养上清液对CD34+造血祖细胞的作用较辐射前具有明显的扩增作用(P<0.01).结论Egr-1调控序列启动的造血生长因子基因在辐射后表达明显增高并促进造血祖细胞增殖作用.