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目的在克隆IκBα基因并构建IκBαM的基础上,构建重组腺病毒AdIκBαM.方法将IκBαM克隆至穿梭质粒,线性化后与骨架质粒共同转染BJ5183菌,构建重组腺病毒质粒.酶切及PCR法鉴定;将其线性化后转染293细胞,观察绿色荧光以确定转染结果,以Western blot法检测目的基因表达.结果凝胶电泳及行酶切鉴定表明同源重组成功;PCR产物测序证明确为IκBαM;以重组腺病毒质粒转染293细胞,见绿色荧光;感染293细胞得到大量病毒.结论成功构建了IκBαM重组腺病毒,为进一步研究奠定了基础.

作者:刘冰熔;黄爱龙;肖彧君;沈鼎明

来源:免疫学杂志 2004 年 20卷 1期

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作者:
刘冰熔;黄爱龙;肖彧君;沈鼎明
来源:
免疫学杂志 2004 年 20卷 1期
标签:
NF-κB IκBα 腺病毒 基因治疗
目的在克隆IκBα基因并构建IκBαM的基础上,构建重组腺病毒AdIκBαM.方法将IκBαM克隆至穿梭质粒,线性化后与骨架质粒共同转染BJ5183菌,构建重组腺病毒质粒.酶切及PCR法鉴定;将其线性化后转染293细胞,观察绿色荧光以确定转染结果,以Western blot法检测目的基因表达.结果凝胶电泳及行酶切鉴定表明同源重组成功;PCR产物测序证明确为IκBαM;以重组腺病毒质粒转染293细胞,见绿色荧光;感染293细胞得到大量病毒.结论成功构建了IκBαM重组腺病毒,为进一步研究奠定了基础.