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目的 构建并鉴定H2O2 诱导小鼠睾丸间质TM3 细胞铁死亡模型.方法 常规培养TM3 细胞,采用MTS法选择H2O2 的处理浓度,设置TM3细胞常规培养组(T组)、2 mmol·L-1 H2O2 处理TM3 细胞 1h组(H2O2-T组)、1 μmol·L-1 GSH过氧化物酶 4 抑制剂(RSL3)处理TM3 细胞 1h组(RSL3-T组)和 3 μmol·L-1 iFSP1 处理TM3 细胞 24h组(iFSP1-T组);采用流式细胞术检测活性氧(ROS)水平;检测试剂盒检测细胞的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和脂质过氧化物(LPO)含量,Phen-Green-SK荧光探针经激光共聚焦显微镜检测Fe2+含量;采用透射电镜观察线粒体形态结构.结果 根据MTS法选择 2 mmol·L-1 H2O2 处理TM3 细胞;与T组相比,H2O2-T组ROS水平、MDA和LPO含量均上升(P均<0.001)、SOD活性下降(P<0.001);细胞内Fe2+含量上升(P<0.01),与RSL3-T组和iFSP1-T组相比,H2O2-T组细胞内LPO、Fe2+含量差异均无统计学意义(P均>0.05);透射电镜结果显示,H2O2-T组细胞线粒体变小皱缩,嵴减少,外膜破裂,与RSL3-T组和iFSP1-T组相似.结论 H2O2 可诱导小鼠睾丸间质细胞TM3 细胞发生铁死亡.

作者:王佳;马丽媛;母春兰;刘春莲;焦海燕

来源:宁夏医科大学学报 2023 年 45卷 5期

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作者:
王佳;马丽媛;母春兰;刘春莲;焦海燕
来源:
宁夏医科大学学报 2023 年 45卷 5期
标签:
铁死亡 活性氧 脂质过氧化物 线粒体 Fe2+含量
目的 构建并鉴定H2O2 诱导小鼠睾丸间质TM3 细胞铁死亡模型.方法 常规培养TM3 细胞,采用MTS法选择H2O2 的处理浓度,设置TM3细胞常规培养组(T组)、2 mmol·L-1 H2O2 处理TM3 细胞 1h组(H2O2-T组)、1 μmol·L-1 GSH过氧化物酶 4 抑制剂(RSL3)处理TM3 细胞 1h组(RSL3-T组)和 3 μmol·L-1 iFSP1 处理TM3 细胞 24h组(iFSP1-T组);采用流式细胞术检测活性氧(ROS)水平;检测试剂盒检测细胞的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和脂质过氧化物(LPO)含量,Phen-Green-SK荧光探针经激光共聚焦显微镜检测Fe2+含量;采用透射电镜观察线粒体形态结构.结果 根据MTS法选择 2 mmol·L-1 H2O2 处理TM3 细胞;与T组相比,H2O2-T组ROS水平、MDA和LPO含量均上升(P均<0.001)、SOD活性下降(P<0.001);细胞内Fe2+含量上升(P<0.01),与RSL3-T组和iFSP1-T组相比,H2O2-T组细胞内LPO、Fe2+含量差异均无统计学意义(P均>0.05);透射电镜结果显示,H2O2-T组细胞线粒体变小皱缩,嵴减少,外膜破裂,与RSL3-T组和iFSP1-T组相似.结论 H2O2 可诱导小鼠睾丸间质细胞TM3 细胞发生铁死亡.