目的：探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白（CTLA4-Ig）基因转染骨髓间充质干细胞（MSC）在抑制大鼠原位肝移植排斥反应的作用及机制。方法采用重组腺病毒（Ad）5-CTLA4-Ig转染MSC。转染72 h后，提取细胞总蛋白，采用蛋白质印迹法检测转染后MSC中CTLA4-Ig的蛋白表达。采用细胞计数试剂盒（CCK）-8方法检测未转染和转染后的MSC对外周血淋巴细胞增殖的抑制作用。以雄性Lewis大鼠为供体（40只）；以雄性Brown Norway （BN）大鼠为受体（40只）。采用改良的Kamada两袖套法进行原位肝移植，建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型。40只受体大鼠随机分为4组，每组10只。其中对照组（A组），于肝移植时门静脉输注生理盐水；MSC治疗组（B组），于肝移植时门静脉输注MSC；转基因MSC治疗组（C组），于肝移植时门静脉输注转基因MSC；免疫抑制剂治疗组（D组），于肝移植时门静脉输注生理盐水，术后即给予环孢素（CsA）1.5 mg /（kg·d）肌内注射，连续8 d。每组大鼠取5只观察生存情况。每组其余5只于术后第9日处死，检测外周血细胞因子白细胞介素（IL）-2、IL-4、干扰素（IFN）-γ水平，光学显微镜下观察肝组织病理学变化和排斥反应程度。结果重组Ad5-CTLA4-Ig转染MSC 72 h后，蛋白质印迹法可检测到转染后的MSC
作者：尹东亮；孙罛；朱焕斌；李坤；李浩辉；张剑
来源：器官移植 2014 年 4期
