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目的 探讨FAM234A是否为一种新的非Gal异种移植抗原.方法 用α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除(GTKO)小型猪的原代猪主动脉内皮细胞(PAEC)免疫食蟹猴.将免疫的猴血清与PAEC孵育,其中经免疫产生的猴抗猪细胞抗体能够识别并结合PAEC表面的未知抗原.采用流式细胞术测定PAEC表面结合的猴抗猪细胞抗体的平均荧光强度(MFI),用以表示PAEC表面抗原的含量.利用慢病毒介导的短发夹核糖核酸(shRNA)敲减PAEC中的FAM234A基因,检测该细胞结合的猴抗猪细胞抗体含量是否减少,以确定该基因是否为潜在的移植抗原.结果 PAEC中的非Gal抗原能够在猴体内引发大量的猴抗猪细胞抗体.在GTKO小型猪的PAEC中用shRNA敲减FAM234A基因后,PAEC结合的猴IgG抗体减少.结论 FAM234A是一种新的非Gal异种移植抗原.

作者:谢崇伟;戴文杰;张军方;蔡志明;牟丽莎

来源:器官移植 2018 年 9卷 5期

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谢崇伟;戴文杰;张军方;蔡志明;牟丽莎
来源:
器官移植 2018 年 9卷 5期
标签:
异种移植 非Gal抗原 主动脉内皮细胞(PAEC) FAM234A 食蟹猴 α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除(GTKO) 流式细胞术 短发夹核糖核酸(shRNA) 基因敲减 巴马小型猪 五指山小型猪 慢病毒
目的 探讨FAM234A是否为一种新的非Gal异种移植抗原.方法 用α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除(GTKO)小型猪的原代猪主动脉内皮细胞(PAEC)免疫食蟹猴.将免疫的猴血清与PAEC孵育,其中经免疫产生的猴抗猪细胞抗体能够识别并结合PAEC表面的未知抗原.采用流式细胞术测定PAEC表面结合的猴抗猪细胞抗体的平均荧光强度(MFI),用以表示PAEC表面抗原的含量.利用慢病毒介导的短发夹核糖核酸(shRNA)敲减PAEC中的FAM234A基因,检测该细胞结合的猴抗猪细胞抗体含量是否减少,以确定该基因是否为潜在的移植抗原.结果 PAEC中的非Gal抗原能够在猴体内引发大量的猴抗猪细胞抗体.在GTKO小型猪的PAEC中用shRNA敲减FAM234A基因后,PAEC结合的猴IgG抗体减少.结论 FAM234A是一种新的非Gal异种移植抗原.