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目的:应用抑制性消减杂交技术,构建人甲状腺癌与正常甲状腺差异表达的cDNA消减文库.方法:分别从甲状腺癌及正常甲状腺组织中提取总RNA,应用高效、灵敏的抑制性消减杂交技术,构建成功cDNA消减文库,再转染大肠杆菌进行文库扩增.结果:构建成功具有高消减效率的人甲状腺癌组织cDNA消减文库, 文库扩增得到了400个克隆,随机挑取50个制备质粒,酶切分析均得到50~400 bp大小插入片段,这些片段可能就是载有高度特异性的目的片段,结论:人甲状腺癌组织cDNA消减文库的建立为进一步克隆甲状腺癌特异性表达的新基因奠定了基础.

作者:郑天荣;力超;郑秋红;谢云青;龚福生;汪相如

来源:肿瘤防治杂志 2003 年 10卷 9期

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作者:
郑天荣;力超;郑秋红;谢云青;龚福生;汪相如
来源:
肿瘤防治杂志 2003 年 10卷 9期
标签:
甲状腺肿瘤/遗传学 DNA,互补 基因,抑制,肿瘤 基因表达 遗传学技术 杂交
目的:应用抑制性消减杂交技术,构建人甲状腺癌与正常甲状腺差异表达的cDNA消减文库.方法:分别从甲状腺癌及正常甲状腺组织中提取总RNA,应用高效、灵敏的抑制性消减杂交技术,构建成功cDNA消减文库,再转染大肠杆菌进行文库扩增.结果:构建成功具有高消减效率的人甲状腺癌组织cDNA消减文库, 文库扩增得到了400个克隆,随机挑取50个制备质粒,酶切分析均得到50~400 bp大小插入片段,这些片段可能就是载有高度特异性的目的片段,结论:人甲状腺癌组织cDNA消减文库的建立为进一步克隆甲状腺癌特异性表达的新基因奠定了基础.