目的 肿瘤DNA疫苗已被证明是一种有效治疗恶性肿瘤的免疫治疗方法.以GPC3基因为目的基因建构重组质粒GPC3 DNA疫苗,探讨该疫苗对肝细胞癌特异性杀伤作用.方法 根据GenBank数据库提供小鼠GPC3的开放读码框全长DNA序列建构GPC3基因重组质粒(pReceiver-M29-GPC3).用该GPC3 DNA疫苗通过肌注免疫C57BL/6小鼠,同时设立空载体组和生理盐水组作为对照组.ELISPOT检测免疫后小鼠脾脏T淋巴细胞免疫活性,MTT法检测细胞毒性T淋巴细胞对表达GPC3的肝癌细胞特异性杀伤作用.结果 成功建构GPC3基因重组质粒(GPC3 DNA疫苗).GPC3 DNA疫苗组小鼠T淋巴细胞分泌γ-干扰素(interferon-gamma,IFN-γ)斑点数(中位数为87个)高于空载体组和生理盐水组(中位数分别为3和2个),差异有统计学意义,x2=15.901,P<0.001,后两者比较差异无统计学意义,W=60.000,P=0.442.疫苗组、空载体组和生理盐水组小鼠活化的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocyte,CTL)对小鼠肝癌细胞Hepa1-6(GPC3阳性)杀伤率分别为(35.13±7.98)%、(3.36±3.32)%和(3.55±3.90)%,前者杀伤率高于后两者,差异有统计学意义,x2=15.365,P<0.001,后两者比较差异无统计学意义,W=67.000,P=0.959;疫苗免疫后小鼠活化CTL对GPC3阳性的Hepa16和HepG2细胞杀伤率分别为(35.13±7.98)
作者:林杰;王卫东;刘清波;何威;陈坚平;马靖
来源:中华肿瘤防治杂志 2019 年 26卷 4期