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目的 探索含Oct4、Sox2、C-Myc、Klf4四个基因的腺病毒载体感染小鼠的胚胎成纤维细胞技术,为制备诱导多能干细胞(iPSCs)研究奠定基础.方法 将胎鼠躯干用胰蛋白酶消化法分离培养小鼠胚胎成纤维细胞(MEF),将小鼠的胚胎成纤维细胞随机分为3组:A组:Oct4、Sox2、C-Myc、Klf4腺病毒载体感染组;B组:空病毒颗粒感染组;C组:正常对照组.用目的基因感染小鼠胚胎成纤维细胞,并观察其形态变化.结果 腺病毒感染小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的最佳感染复数(MOI)为20-100.A组细胞变为半椭圆形,B组和C组为为长梭形.结论 含Oct4、Sox2、C-Myc、Klf4四因子腺病毒载体成功感染了小鼠胚胎成纤维细胞,表明目的基因明显影响了MEF的形态,MEF细胞由长梭形变成了椭圆形或不规则形,为下一步实验奠定了基础.

作者:彭道琥;钟德君;廖烨晖

来源:四川医学 2017 年 38卷 4期

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作者:
彭道琥;钟德君;廖烨晖
来源:
四川医学 2017 年 38卷 4期
标签:
腺病毒载体 小鼠胚胎成纤维细胞 多能干细胞 最佳感染复数 adenovirus vector mouse embryonic fibroblasts induced pluripotent stem cells optimal number of infeetive complex
目的 探索含Oct4、Sox2、C-Myc、Klf4四个基因的腺病毒载体感染小鼠的胚胎成纤维细胞技术,为制备诱导多能干细胞(iPSCs)研究奠定基础.方法 将胎鼠躯干用胰蛋白酶消化法分离培养小鼠胚胎成纤维细胞(MEF),将小鼠的胚胎成纤维细胞随机分为3组:A组:Oct4、Sox2、C-Myc、Klf4腺病毒载体感染组;B组:空病毒颗粒感染组;C组:正常对照组.用目的基因感染小鼠胚胎成纤维细胞,并观察其形态变化.结果 腺病毒感染小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的最佳感染复数(MOI)为20-100.A组细胞变为半椭圆形,B组和C组为为长梭形.结论 含Oct4、Sox2、C-Myc、Klf4四因子腺病毒载体成功感染了小鼠胚胎成纤维细胞,表明目的基因明显影响了MEF的形态,MEF细胞由长梭形变成了椭圆形或不规则形,为下一步实验奠定了基础.