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目的:探讨大鼠胰岛细胞分离、纯化及培养的方法,并评价其生物学功能.方法:选用8～10周龄健康SD大鼠,采用胆总管逆行注射预冷胶原酶P溶液,37℃水浴静止消化,30目不锈钢筛网过滤,Ficoll400非连续密度梯度离心纯化.分离后的胰岛用DTZ染色计算胰岛产量,胰岛素释放试验评价其生物学功能.结果:胰岛细胞分布于Ficoll400浓度为23％～20％和20％～11％的界面之间.DTZ染色呈红色细胞团,胰岛产量为(606±56)IEQ/胰腺.纯度高达80～90％,活率≥90％,胰岛素释放功能良好.结论:胶原酶P溶液原位消化,Ficoll400纯化是一种高效简便的胰岛分离方法,分离的胰岛细胞数量多、纯度高及活性好.
作者：丁和远；徐东丽；王芳；查兵兵；盛励；徐炯；刘军
来源：现代生物医学进展 2014 年 14卷 15期
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