目的:探讨MDA-MB-231细胞经无血清培养富集三阴性乳腺癌干细胞,观察再成球、集落形成及CD44+CD24-/low、CXCR4表达.方法:将MDA-MB-231乳腺癌细胞进行微球体培养,取培养第7-9天的微球体,判断干细胞富集的程度;比较不同细胞浓度对癌球细胞成球率影响;流式细胞仪测定CD44+CD24-/low含量;Western blot法分析CXCR4蛋白表达;单个癌球细胞再成球能力;观察癌球与贴壁细胞集落形成.结果:1).在含20 ng/mL EGF,10 ng/mL bFGF,2％b27无血清培养基中可培养三阴性乳腺癌癌球,1× 104/mL、2×104/mL、3×104/mL、4×104/mL、5×104/mL细胞浓度癌球细胞成球率分别为(5.61±0.02)％、(3.23±0.54)％、(2.28±0.48)％、(1.05±0.13)％、(0.91± 0.01)％,组间比较差异有统计学意义P值均＜0.05.2).贴壁MDA-MB-231细胞与癌球细胞CD44+CD24-/low含量分别为(38.54±2.00)％VS (66.35±2.06)％,差异有统计学意义P=0.003.3).癌球细胞CXCR4蛋白表达高于贴壁MDA-MB-231细胞,灰度扫描分析差异有统计学意义,P=0.03.4).单个癌球细胞具有再成球能力.5).软琼脂糖集落形成能力癌球需200个细胞即可见集落形成,而贴壁细胞需1 000个MDA-MB-231细胞.结论:1.通过无血清培养可以富集三阴性乳腺癌干细胞,低细胞密度有利于癌球形成.2.癌球中CD44+CD

作者：刘红光；文波；康颖；祖旭宇；赵茂勋；王雄宇

来源：现代生物医学进展 2015 年 15卷 4期