目的:探讨自噬在周期性张应力介导的成肌细胞凋亡中的作用,以明确应力诱导内质网应激引起自噬与凋亡之间的关系.方法:在成功构建L6大鼠体外培养——力学刺激模型的基础上,采用Western Blot法分析周期性张应力对自噬相关蛋白LC3蛋白表达的影响,并通过Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况.加力组分别给予1,6,12,24 h的力学刺激(拉伸变形率为15%,频率为10循环/min),3-MA组和Rapamycin组在加力2h前分别加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤和自噬激活剂雷帕霉素并且加力24h,0h组与实验组在同时种板但是不给予力刺激.采用SPSS17.0统计软件对以上数据进行统计分析.结果:成肌细胞中的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ值随加力时间延长呈上升趋势,24 h达最高(P<0.05);抑制组的细胞凋亡率(18.75± 1.06%)相对于0 h组(0.726±0.13%)和加力24 h组(14.84± 1.14%)的明显升高(P<0.05);Rapamycin组相对于加力24 h组的细胞凋亡率明显下降(8.88± 1.08%vs 14.84± 1.14%),但是细胞凋亡率仍然高于0h组的(8.88± 1.08 %vs 0.726± 0.13%).结论:在一定时间范围内,周期性张应力可诱导成肌细胞发生自噬,并且自噬活性与作用时间成正比;自噬可以降低应力介导的成肌细胞凋亡的活性.
作者:孙文娜;贺苗;夏晨蕾;丁弦;张强;王爽玉;王芳;张彩霞;姜文心
来源:现代生物医学进展 2016 年 16卷 11期