目的:探讨肝癌衍生生长因子 (HDGF) 对HepG2细胞增殖和脂质代谢的影响.方法:用脂质体包裹si RNA的方法沉默HDGF基因, 用实时荧光定量PCR法和蛋白质免疫印迹法检测HDGF在mRNA和蛋白水平的变化, 检测细胞总甘油三酯、胆固醇含量并用油红O染色, CCK-8检测及琼脂糖凝胶克隆形成, 实时荧光定量PCR法检测脂质代谢相关酶的mRNA表达.结果:将靶向HDGF小干扰 (si RNA-HDGF) 转染到HepG2细胞后, 可明显抑制HDGF的mRNA表达 (P<0.001) 和蛋白表达.HDGF蛋白抑制后, 细胞增殖在48 h (P<0.01) 、72 h (P<0.001) 和96 h (P<0.001) 均明显降低;细胞内总甘油三酯及胆固醇水平也明显降低 (P<0.05, P<0.01).此外, 油红O染色显示细胞内脂滴有明显的减少.脂质代谢相关酶脂肪酸合成酶 (FASN) 、羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶 (HMGCR) 、硬脂酰辅酶A去饱和酶 (SCD) 及ATP-柠檬酸裂解酶 (ACLY) 的mRNA表达均明显降低 (P<0.001, P<0.001, P<0.001, P<0.01).结论:抑制HDGF的表达可明显降低HepG2细胞内脂质代谢水平并抑制其增殖.
作者:闵雪洁;文君;赵丽;刘建军;黄钢;赵小平
来源:现代生物医学进展 2018 年 18卷 11期