目的:探讨沉默丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK1) 对牛磺胆酸钠诱导的胰腺腺泡细胞内胰蛋白酶原激活及自噬流的影响.方法:选择体外培养的AR42J细胞分为AR42J细胞+空白对照组, AR42J细胞+牛磺胆酸钠 (TLC) (200μM的TLC作用40 min), AR42J细胞+RNA1 (MAPK1).分别转染MAPK1 si RNA以及阴性对照, 采用BZi PAR、流式细胞术及激光共聚焦显微镜检测胰蛋白酶原激活, western blot技术检测各组自噬相关蛋白LC3、Beclin1、Cathepsin L, 组织蛋白酶L (Cathepsin L, CTSL, 也称为CTSL1) 和溶酶体膜蛋白 (Lysosomal associated membrane protein 2, LAMP2).结果:TLC处理AR42J细胞后, 胰蛋白酶原激活显著增加 (阳性细胞相对比:15.12%±1.46%vs.7.82%±1.86%, P<0.05, 平均荧光强度:7.65±0.72 vs.3.76±0.57, P<0.05), MAPK1 si RNA转染后TLC处理AR42J细胞后细胞内胰蛋白酶原激活则较TLC组明显降低 (阳性细胞相对比:9.25%±1.16%vs.15.12%±1.46%, P<0.05, 平均荧光强度:4.31±0.27 vs.7.65±0.72, P<0.05).TLC组Beclin1与LC3表达显著性高于对照组 (Beclin1:2.237±0.097 vs.1.103±0.057, P<0.05.LC3:1.908±0.039 vs.0.973±0.081, P<0.05), TLC+MAPK1si RNA组Beclin1与LC3的表达显著低于TLC组 (Beclin1:1.2
作者:陈子昂;宋宗工;王昊;苗壮;蒋彦峰;薛东波
来源:现代生物医学进展 2018 年 18卷 16期