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目的:表达及纯化甘油脱水酶γ亚基蛋白.方法:使用PCR及DNA重组技术,将甘油脱水酶γ亚基基因gldC重组到含麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白表达载体pMAL-c2x中,在大肠杆菌中进行表达.结果:转化重组质粒pMAL/gldC的大肠杆菌经IPTG诱导,SDS-PAGE分析显示表达出的MBP-gldC融合蛋白相对分子质量约66kD,与预期大小一致,并经Western blot分析证实.用直链淀粉树脂亲和层析纯化得到电泳均一的融合蛋白.结论:成功地获得甘油脱水酶γ亚基融合蛋白,以便进一步研究其生物学性能.

作者:陈永胜;刘长江;刘春萍;邵敬伟;翟景波

来源:生物技术 2005 年 15卷 1期

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作者:
陈永胜;刘长江;刘春萍;邵敬伟;翟景波
来源:
生物技术 2005 年 15卷 1期
标签:
甘油脱水酶 gldC基因 原核表达 融合蛋白
目的:表达及纯化甘油脱水酶γ亚基蛋白.方法:使用PCR及DNA重组技术,将甘油脱水酶γ亚基基因gldC重组到含麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白表达载体pMAL-c2x中,在大肠杆菌中进行表达.结果:转化重组质粒pMAL/gldC的大肠杆菌经IPTG诱导,SDS-PAGE分析显示表达出的MBP-gldC融合蛋白相对分子质量约66kD,与预期大小一致,并经Western blot分析证实.用直链淀粉树脂亲和层析纯化得到电泳均一的融合蛋白.结论:成功地获得甘油脱水酶γ亚基融合蛋白,以便进一步研究其生物学性能.