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目的:从中国高校工业微生物资源与信息中心(CICIM-CU)细菌库中分离具有产脱枝酶酶活的细菌并鉴定,进行酶学性质的研究.方法:通过碘显色平板法筛选产酶菌株,利用16S rDNA确定其属种.对每一株产脱枝酶的细菌进行初步的酶学性质研究.结果:从4005株细菌中筛选出45株产脱枝酶的细菌,建立了产脱枝酶细菌的细菌库.酶学性质表明CICIM B272、CICIMB1-30两株菌产生的脱枝酶,酶反应的最适温度分别为70℃、60℃,最适pH分别为6.0、5.5,来源于上述两种不同属种的脱枝酶在30-70℃反应条件下,酶在pH4.5~8.5范围内活性稳定,Li~+、Na~+、K~+、M~(2+)、Mn~(2+)对两者酶活均有显著的激活作用,而Cu~(2+)、Fe~(3+)及EDTA对两者均有显著的抑制作用,Mn~(2+)、Ca(2+)分别对两者的热稳定性具有很好的提升作用.以支链淀粉为底物的动力学常数K_m分别为352.883mg/mL、4.5814mg/mL,V_(max)分别为30.03mg/min·mL、0.4575mg/min·mL.结论:不同属种的脱枝酶酶学性质差别显著.

作者:赵献春;陈源源;王正祥

来源:生物技术 2009 年 19卷 6期

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作者:
赵献春;陈源源;王正祥
来源:
生物技术 2009 年 19卷 6期
标签:
脱枝酶 分离 鉴定 酶学性质 debranching enzyme screening identification enzymatic properties
目的:从中国高校工业微生物资源与信息中心(CICIM-CU)细菌库中分离具有产脱枝酶酶活的细菌并鉴定,进行酶学性质的研究.方法:通过碘显色平板法筛选产酶菌株,利用16S rDNA确定其属种.对每一株产脱枝酶的细菌进行初步的酶学性质研究.结果:从4005株细菌中筛选出45株产脱枝酶的细菌,建立了产脱枝酶细菌的细菌库.酶学性质表明CICIM B272、CICIMB1-30两株菌产生的脱枝酶,酶反应的最适温度分别为70℃、60℃,最适pH分别为6.0、5.5,来源于上述两种不同属种的脱枝酶在30-70℃反应条件下,酶在pH4.5~8.5范围内活性稳定,Li~+、Na~+、K~+、M~(2+)、Mn~(2+)对两者酶活均有显著的激活作用,而Cu~(2+)、Fe~(3+)及EDTA对两者均有显著的抑制作用,Mn~(2+)、Ca(2+)分别对两者的热稳定性具有很好的提升作用.以支链淀粉为底物的动力学常数K_m分别为352.883mg/mL、4.5814mg/mL,V_(max)分别为30.03mg/min·mL、0.4575mg/min·mL.结论:不同属种的脱枝酶酶学性质差别显著.