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利用基因定点突变技术分别将bR/aR4(细菌视紫红质/古紫质-4)中L93/L94(亮氨酸 93/亮氨酸 94)突变为侧链不同的丙氨酸、苯丙氨酸和极性不同的苏氨酸,得到bR、含菌红素BI-aR4 和缺失菌红素BE-aR4 体系突变蛋白,采用紫外-可见光吸收光谱、闪光光解光谱技术和pH滴定等方法,对比研究L94 在aR4 中对视黄醛构象、光循环及质子传输的影响及其同菌红素的关系.结果表明,aR4 中L94 同样会通过空间位阻效应调控视黄醛键合区构象和质子通道的螺旋分布,以维持视黄醛顺-反异构平衡和再异构化过程,并且促进质子的释放,保证蛋白高效的质子泵活性.此外,L94 对aR4 结构和功能的影响会受到菌红素的调制,在缺失菌红素的情况下L94 突变对aR4 螺旋的扰动更加剧烈,导致质子供体和质子释放簇周围的氢键网络发生变化.

作者:刘冬雪;赵欣

来源:生物学杂志 2023 年 40卷 4期

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作者:
刘冬雪;赵欣
来源:
生物学杂志 2023 年 40卷 4期
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古紫质-4 光驱质子泵 亮氨酸94 菌红素 细菌视紫红质 archearhodopsin-4 light-driven proton pump leucine 94 bacterioruberin bacteriorhodopsin
利用基因定点突变技术分别将bR/aR4(细菌视紫红质/古紫质-4)中L93/L94(亮氨酸 93/亮氨酸 94)突变为侧链不同的丙氨酸、苯丙氨酸和极性不同的苏氨酸,得到bR、含菌红素BI-aR4 和缺失菌红素BE-aR4 体系突变蛋白,采用紫外-可见光吸收光谱、闪光光解光谱技术和pH滴定等方法,对比研究L94 在aR4 中对视黄醛构象、光循环及质子传输的影响及其同菌红素的关系.结果表明,aR4 中L94 同样会通过空间位阻效应调控视黄醛键合区构象和质子通道的螺旋分布,以维持视黄醛顺-反异构平衡和再异构化过程,并且促进质子的释放,保证蛋白高效的质子泵活性.此外,L94 对aR4 结构和功能的影响会受到菌红素的调制,在缺失菌红素的情况下L94 突变对aR4 螺旋的扰动更加剧烈,导致质子供体和质子释放簇周围的氢键网络发生变化.