目的:检测隐丹参酮、丹参酮ⅡA对人肺腺癌A549细胞分泌的外泌体中内源性非编码小RNA(microRNA,miRNA)的差异表达情况.观察外泌体对HUVEC细胞的作用,并初步探索其作用机制.方法:取对数生长期的A549细胞,分别以隐丹参酮6 μg/mL及丹参酮ⅡA 4 μg/mL给药,用无血清的培养基培养24小时后,细胞上清液按照说明书提取外泌体.采用高通量测序技术,检测各组A549细胞中miRNA的表达情况,对外泌体中hsa-miR-1246进行验证,对获得的差异基因进行GO和KEGG分析.以各组外泌体加入HUVEC细胞中,并采用CCK-8实验和划痕实验,分别检测各组外泌体对HUVEC细胞的抑制作用和迁移作用,检测HUVEC细胞中CD31的基因和蛋白表达.结果:高通筛选结果发现隐丹参酮能够上调109个miRNA,下调78个miRNA;丹参酮ⅡA能够上调35个miRNA,下调40个miRNA.将有差异的miRNA进行功能与通路的富集分析,显示隐丹参酮、丹参酮ⅡA差异表达基因主要与内吞作用、癌症通路、MAPK信号通路、hippo信号通路、Wnt信号通路、癌症中的microRNAs、Rap1信号通路、肌动蛋白细胞骨架的调节等相关.细胞增殖实验发现,空白外泌体和隐丹参酮外泌体对HUVEC细胞的增殖均具有显著的抑制作用,且隐丹参酮外泌体的抑制作用明显高于空白外泌体.细胞划痕实验发现,外泌体给药后,迁移率均有
作者：郑琦；王学谦；薛超；王翰洲；刘硕；侯炜
来源：现代肿瘤医学 2024 年 32卷 9期
