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目的 探讨鸦胆子苦醇对雌性生殖细胞减数分裂启动及早期卵子发生的影响.方法 6~8周小鼠雌雄合笼,以雌性小鼠见阴栓记为胚胎0.5 d(E0.5).收集E11.5、E12.5、E13.5、E14.5的雌性胎鼠生殖嵴,分别通过qRT-PCR及Western blotting检测核因子E2(NF-E2)相关因子2(Nrf2)mRNA及蛋白水平.分离E12.5雌性胎鼠的生殖嵴,分别用二甲基亚砜(对照组)、10 nmol/L、20 nmol/L的Nrf2抑制剂——鸦胆子苦醇、1 μmol/L视黄酸或20 nmol/L鸦胆子苦醇+1 μmol/L视黄酸处理48 h后,检测Nrf2通路、减数分裂启动、视黄酸信号通路相关基因的mRNA水平.药物处理48 h后继续培养10d,对体外培养的生殖嵴行石蜡切片和HE染色进行原始卵泡计数.结果 与对照组相比,10 nmol/L、20 nmol/L的鸦胆子苦醇显著下调减数分裂启动关键基因Stra8、Sycp3及Daz1的mRNA水平(P<0.05).与对照组的单位面积卵泡数量(151.1±6.8)相比,10 nmol/L、20 nmol/L组的单位面积原始卵泡数量显著减少(109.5±12.2,49.1±8.0)(P<0.01).与对照组相比,20 nmol/L鸦胆子苦醇显著抑制视黄酸合成酶(P=0.001)及其受体(P=0.049)的表达.添加视黄酸能部分挽救鸦胆子苦醇对基因Raldh、RARa(P<0.01)及基因Stra8、Sycp3及Dazl的表达抑制作用(P<0.01).结论 鸦胆子苦醇通过抑制Nrf2通路调

作者:裘旭华;周吉;马汝钧;戈榭;林莹;姚兵

来源:中华生殖与避孕杂志 2019 年 39卷 3期

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作者:
裘旭华;周吉;马汝钧;戈榭;林莹;姚兵
来源:
中华生殖与避孕杂志 2019 年 39卷 3期
标签:
核因子E2相关因子2 鸦胆子苦醇 生殖嵴 视黄酸 小鼠 Nuclear factor-E2 related factor 2 Brusatol Genital ridge Retinoic acid Mouse
目的 探讨鸦胆子苦醇对雌性生殖细胞减数分裂启动及早期卵子发生的影响.方法 6~8周小鼠雌雄合笼,以雌性小鼠见阴栓记为胚胎0.5 d(E0.5).收集E11.5、E12.5、E13.5、E14.5的雌性胎鼠生殖嵴,分别通过qRT-PCR及Western blotting检测核因子E2(NF-E2)相关因子2(Nrf2)mRNA及蛋白水平.分离E12.5雌性胎鼠的生殖嵴,分别用二甲基亚砜(对照组)、10 nmol/L、20 nmol/L的Nrf2抑制剂——鸦胆子苦醇、1 μmol/L视黄酸或20 nmol/L鸦胆子苦醇+1 μmol/L视黄酸处理48 h后,检测Nrf2通路、减数分裂启动、视黄酸信号通路相关基因的mRNA水平.药物处理48 h后继续培养10d,对体外培养的生殖嵴行石蜡切片和HE染色进行原始卵泡计数.结果 与对照组相比,10 nmol/L、20 nmol/L的鸦胆子苦醇显著下调减数分裂启动关键基因Stra8、Sycp3及Daz1的mRNA水平(P<0.05).与对照组的单位面积卵泡数量(151.1±6.8)相比,10 nmol/L、20 nmol/L组的单位面积原始卵泡数量显著减少(109.5±12.2,49.1±8.0)(P<0.01).与对照组相比,20 nmol/L鸦胆子苦醇显著抑制视黄酸合成酶(P=0.001)及其受体(P=0.049)的表达.添加视黄酸能部分挽救鸦胆子苦醇对基因Raldh、RARa(P<0.01)及基因Stra8、Sycp3及Dazl的表达抑制作用(P<0.01).结论 鸦胆子苦醇通过抑制Nrf2通路调