目的 探讨高雄激素和程序性细胞凋亡因子4(PDCD4)在人颗粒细胞凋亡中的作用.方法 在人卵巢颗粒细胞系KGN中转染PDCD4表达载体,荧光定量PCR的方法检测过表达前后PDCD4的表达情况,应用流式细胞仪技术和Annexin V染色检测PDCD4过表达对KGN细胞凋亡的影响;应用不同浓度梯度的睾酮(0、10-7 mol/L、10-6 mol/L、10-5 mol/L)处理KGN细胞,分别于24 h和48 h后应用实时定量PCR和Western blotting的方法检测不同浓度睾酮处理后颗粒细胞中PDCD4的表达水平,通过流式细胞仪技术检测48 h后不同浓度梯度的睾酮对颗粒细胞凋亡的影响.应用PDCD4小干扰RNA在高浓度睾酮(10-5 mol/L)处理的KGN细胞中敲低PDCD4的表达,应用流式细胞仪技术检测PDCD4的表达敲低对高雄激素诱导的细胞凋亡的影响.结果 PDCD4在人卵巢颗粒细胞系KGN细胞中过表达后,Annexin V-PE染色和流式细胞仪检测结果显示KGN细胞凋亡数显著增加(P=0.014).不同睾酮浓度处理KGN细胞,与NC组比,10-5 mol/L组和10-6 mol/L组PDCD4基因表达水平均上调(24 h:P=0.035,P=0.038;48 h:P=0.029,P=0.009);PDCD4蛋白水平表达升高.高浓度的睾酮(10-6 mol/L和10-5 mol/L)处理KGN细胞48 h后,颗粒细胞凋亡显著增加(10-6 mol/L组与NC组比较P=0.036;10-5 mol/L组与NC组比较P=0.028),差异具
作者:仇雪梅;丁晨;魏友华;赵淑芹
来源:中华生殖与避孕杂志 2019 年 39卷 10期