反义PCDNA3.1(+)/TIMP-1真核表达载体的构建与鉴定-临床诊疗知识库

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作者：

李睿；郑勇；周婷；奚海林；潘泽民；杨军

来源：

天津医药 2007 年 35卷 5期

标签：

真核细胞质遗传载体基因表达质粒寡核苷酸类,反义逆转录聚合酶链反应

目的:构建反义TIMP-1真核细胞表达质粒.方法:用Trizol Reagent抽提肝组织中总RNA,采用两对套式引物,以逆转录巢式PCR方法扩增TIMP-1目的片段,双酶切纯化PCR产物及PCDNA3.1(+)真核细胞表达质粒,再将TIMP-1反向插入PCDNA3.1(+)线性质粒,即构建成反义TIMP-1/PCDNA3.1(+)真核细胞表达质粒,经酶切、PCR及DNA测序鉴定.结果:DNA测序结果与预期目的片段序列一致.结论:反义TIMP*1/PCDNA3.1(+)真核细胞表达质粒构建成功.

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