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目的:在人胰腺癌细胞中观察细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)沉默对细胞增殖及干扰素-γ(IFN-γ)敏感性的影响,探讨SOCS1作为胰腺癌治疗靶点的可能。方法 Western blot及PCR验证SOCS1干扰序列沉默人胰腺癌细胞系PANC1中SOCS1的表达;给予IFN-γ刺激后,采用Western blotting方法观察转录激活因子(STAT)1及磷酸化STAT(pSTAT)1的变化;采用定量PCR的方法观察IFN-γ调节因子1(IRF-1)表达水平变化;MTT法检测胰腺癌细胞对IFN-γ敏感性的变化;细胞计数的方法观察细胞的增殖速度;采用流式细胞术的方法检测细胞周期的变化。结果将SOCS1干扰序列转染PANC1细胞后,SOCS1 mRNA及蛋白表达水平均明显下降。沉默SOCS1表达后,pshSOCS1-PANC1组细胞的IRF-1 mRNA水平及pSTAT1蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),IFN-γ对PANC1细胞的半数抑制浓度(IC50)显著降低(P<0.01);转染72 h后PANC1细胞数量较对照组显著减少(P<0.05);SOCS1表达抑制后PANC1细胞G0/G1期细胞比例明显升高,而S期和G2/M期细胞比例明显减小,与对照组比较差异均有统计学意义。结论 SOCS1表达抑制后,人胰腺癌细胞株PANC1的增殖能力下降,并且对IFN-γ的敏感性增强。

作者:吕清林;王娟;陈黎萍

来源:天津医药 2014 年 9期

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作者:
吕清林;王娟;陈黎萍
来源:
天津医药 2014 年 9期
标签:
胰腺肿瘤 癌 基因沉默 细胞增殖 干扰素Ⅱ型 转染 半数抑制浓度 细胞因子信号转导蛋白抑制因子 pancreatic neoplasms carcinoma gene silencing cell proliferation interferon type II transfection IC50 suppressor of cytokine signaling proteins
目的:在人胰腺癌细胞中观察细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)沉默对细胞增殖及干扰素-γ(IFN-γ)敏感性的影响,探讨SOCS1作为胰腺癌治疗靶点的可能。方法 Western blot及PCR验证SOCS1干扰序列沉默人胰腺癌细胞系PANC1中SOCS1的表达;给予IFN-γ刺激后,采用Western blotting方法观察转录激活因子(STAT)1及磷酸化STAT(pSTAT)1的变化;采用定量PCR的方法观察IFN-γ调节因子1(IRF-1)表达水平变化;MTT法检测胰腺癌细胞对IFN-γ敏感性的变化;细胞计数的方法观察细胞的增殖速度;采用流式细胞术的方法检测细胞周期的变化。结果将SOCS1干扰序列转染PANC1细胞后,SOCS1 mRNA及蛋白表达水平均明显下降。沉默SOCS1表达后,pshSOCS1-PANC1组细胞的IRF-1 mRNA水平及pSTAT1蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),IFN-γ对PANC1细胞的半数抑制浓度(IC50)显著降低(P<0.01);转染72 h后PANC1细胞数量较对照组显著减少(P<0.05);SOCS1表达抑制后PANC1细胞G0/G1期细胞比例明显升高,而S期和G2/M期细胞比例明显减小,与对照组比较差异均有统计学意义。结论 SOCS1表达抑制后,人胰腺癌细胞株PANC1的增殖能力下降,并且对IFN-γ的敏感性增强。