目的：检测与干细胞相关的2种因子胚胎干细胞相关转录因子4（Nanog）和分化抗原簇44（CD44）在胃癌细胞株MKN45悬浮球体细胞中的表达。方法选择人胃癌细胞株MKN45，在含有表皮生长因子（EGF）及成纤维生长因子（bFGF）无血清培养液中培养，观察球体形成情况；采用免疫印迹（Western blot）、免疫荧光与实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测干细胞相关基因Nanog和CD44在球体细胞及原代贴壁细胞中的表达差异。结果胃癌细胞株MKN45在无血清培养条件下能形成悬浮球体，球体细胞中的Nanog和CD44的mRNA相对表达量分别为2.34±0.22和1.18±0.04，明显高于贴壁细胞中的Nanog和CD44的mRNA相对表达量1.00±0.00和1.00±0.05；球体细胞中的Nanog和CD44的蛋白质相对表达量分别为0.18±0.02和0.24±0.04，明显高于贴壁细胞中的相对表达量0.07±0.02和0.18±0.01（P＜0.05）。球体细胞中Nanog主要分布在细胞核周围及细胞质中，而CD44主要在细胞膜上表达，且同一个球体细胞中的Nanog与CD44大多同时表达。结论胃癌细胞株MKN45在无血清培养条件下形成的球体细胞具有肿瘤干细胞的特性。Nanog/CD44共表达细胞可能是胃癌干细胞的一种表型。
作者：刘建明；周友浪；马利林；徐骏飞；章建国
来源：天津医药 2015 年 1期
